www.diplomrus.ru ® Авторское выполнение научных работ любой сложности – грамотно и в срок Содержание ОГЛАВЛЕНИЕВВЕДЕНИЕ 41 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ1.1 Биологические особенности спортивных лошадей 111.2 Значение биологически активных продуктов пчеловодства прополиса и цветочной пыльцы в медицине и ветеринарии 192 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ2.1 Материалы и методы исследований 392.2 Результаты собственных исследований2.2.1 Иммунный статус и его коррекция продуктами пчеловодства успортивных лошадей2.2.1.1 Влияние прополиса и цветочной пыльцы в композиции с медом на состояние естественной резистентности спортивных лошадей2.2.1.1.1 Динамика лизоцимной активности сыворотки крови 472.2.1.1.2 Динамика бактерицидной активности сыворотки крови 502.2.1.2 Фагоцитоз, его коррекция прополисом и цветочной пыльцой в композиции с медом у спортивных лошадей 532.2.1.3 Влияние прополиса и цветочной пыльцы в композиции с медом на показатели Т- и В-систем иммунитета спортивных лошадей2.2.1.3.1 Динамика содержания Т-Е-РОК-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-супрессоров в крови 562.2.1.3.2 Динамика содержания В-ЕАС-лимфоцитов в крови 642.2.2 Микробиоценоз кишечника и его коррекция у спортивных ло-шадей2.2.2.1 Динамика бифидобактерий и лактобацилл 672.2.2.2 Динамика содержания условно-патогенных микроорганизмов 732.2.3 Минеральный обмен и его коррекция у спортивных лошадей2.23 Л Динамика содержания общего кальция в крови 852.2.3.2 Динамика содержания железа в крови 882.2.3.3 Динамика содержания цинка в крови 902.2.3.4 Динамика содержания меди в крови 932.2.3.5 Динамика содержания марганца в крови 962.2.4 Коррекция ферментативных обменных процессов у спортивных лошадей2.2.4.1 Динамика содержания глюкозы в крови 992.2.4.2 Динамика содержания общего белка в крови 102 3 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ 106 ВЫВОДЫ 120 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ 122 БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК 123 ПРИЛОЖЕНИЕ 156 Введение ВВЕДЕНИЕАктуальность работы. В условиях научно-технического прогресса народнохозяйственное значение лошади определяется четырьмя основными направлениями: племенное (коннозаводство), рабочепользовательное, продуктивное и спортивное коневодство.Спортивное коневодство включает выращивание и подготовку лошадей для классических видов конного спорта, конно-спортивных игр и состязаний, конного туризма и проката, соревнований, олимпийских игр. Интенсификация спортивного направления возможна за счёт совершенствования существующих, создания новых типов и пород лошадей (украинской верховой, англо-кабардинской и др.), разработки и внедрения прогрессивных технологий выращивания лошадей для разных видов спорта, создания специальных центров по подготовке лошадей к международным и олимпийски играм, подготовки квалифицированных кадров.Развитию конного спорта в Башкортостане стали уделять особое внимание в последние годы. Во многом этому способствовало принятие в 2000 году специального постановления Кабинета Министров РБ, программы развития коневодства в Республике Башкортостан на 2001-2005 годы и создание в 2003 году Координационного совета по коневодству. Все это позволило привлечь к спортивному коневодству максимальное количество коневодческих хозяйств, коневладельцев и спортивных школ.Организм лошади может проявлять максимальные селекционно-обусловленные признаки работоспособности, в том числе свой резвостный потенциал, при стабильных выступлениях в условиях соревнований и иппо-дромных испытаний лишь при наличии соответствующих условий для их реализации.5 Изучение иммунологической реактивности при различных состоянияхорганизма лошадей является одной из основных задач ветеринарной науки.Конноспортивные состязания и подготовка к ним связаны с огромными физическими нагрузками на лошадь на фоне быстро меняющихся условий окружающей среды, принуждения, психоэмоциональных воздействий. Степень и глубина стрессовых «возмущений» в организме спортивных лошадей, их своеобразная «устойчивость» в период соревнований к различным факторам во многом зависит от рациональной системы тренинга, регулярного ветеринарного контроля за состоянием здоровья, кормления и содержания животных. Недостаточно подготовленные троеборные лошади, как правило, снимаются при ветконтроле или плохо выступают в конкурных соревнованиях и надолго выбывают из строя, так как требуется значительное время (недели, месяцы) для восстановления спортивных (рабочих) кондиций (Вогралик М.В., Послов Г.А., 1981, 1985).Как показал анализ отечественной и зарубежной литературы, неправильный режим эксплуатации различных видов животных, в т.ч. и спортивных лошадей, оказывает стрессовые воздействия, последствия которых становятся одной из причин или условий возникновения заболеваний многих органов и систем. При этом, как отмечают исследователи, нарушаются механизмы иммунного гомеостаза, связанного со специфическими и неспецифическими факторами защиты животного организма (Балакин О.А., 1982; Ласков А.А., Пушкарева С.А., 1984; Фролов Б.А., 1984).В настоящее время назрела необходимость изыскания и внедрения способов коррекции естественной резистентности спортивных лошадей, способствующих подавлению последствий нервных и эндокринных механизмов различных стрессов в коневодстве (транспортный, тренинговый и т.д.).Одними из ключевых проблем коневодства являются управление метаболическими процессами в организме спортивных лошадей, обеспечи-6вающее эффективное потребление энергии за счет нетрадиционных кормовых средств, оптимизация полноценности рациона кормления лошадей разных половозрастных групп и направлений использования с помощью биологически активных веществ (БАВ). Особый интерес представляют препараты, изготовленные из природного, легко доступного сырья. К таковым можно отнести препараты пчеловодства - мед, прополис и цветочную пыльцу, обладающих разносторонней биологической активностью.Большое количество научных исследований посвящено изучению биологических свойств прополиса (В.П.Кивалкина, 1948-1991; З.Х.Каримова с соавт., 1973, 1980; Н.В.Панкратов, 1979; Т.А.Шуб, 1982; П.Лави, 1985; А.А.Барсков с соавт., 1990; Н.С.Асфандиярова с соавт., 1993; С.П.Приходько с соавт., 1993; Ш.М.Омаров, 1987, 1997; Р.Т.Маннапова с соавт. 1988- 2001; С.О.Шилов, 2000; П.Я.Гущин с соавт., 2001; А.Ф.Загретдинов, 2000, 2001; З.З.Ильясова, 2001 и др.).Следует отметить, что вопросы влияния продуктов пчеловодства на неспецифические факторы иммунитета спортивных лошадей в доступной литературе освещены недостаточно.В последние годы появилось достаточное количество работ показывающих, что можно с успехом управлять иммунным ответом и при снижении функции иммунитета стимулировать его. Поэтому одной из важных проблем медико-биологической и ветеринарной науки и практики является изыскание мер и средств, направленных на снижение действия неблагоприятных факторов на гомеостаз организма и профилактику развития иммуно-дефицитных состояний.С другой стороны, отмечаются значительные отклонения в аутофлоре животных, вызванные такими явлениями, как нарушения условий содержания и кормления животных, постоянные стрессовые воздействия различной этиологии, широкое и бесконтрольное применение антибактериальных препаратов7и другие факторы, способствующие негативным сдвигам бифидофлоры. На фоне дефицита бифидофлоры нарушаются нормальные соотношения между облигатными микроорганизмами кишечника. Отмечается снижение количества или полная элиминация латобацилл, увеличение или снижение кишечных палочек и повышение ассоциации условно-патогенных бактерий.Низкое содержание бифидобактерий и лактофлоры оказывает неблагоприятное влияние на секреторную функцию кишечника, процессы всасывания, некоторые показатели белкового, липидного и минерального обменов, вита-минсинтезирующую и ферментативную функции. Аномально размножающиеся микроорганизмы продуцируют нежелательные продукты метаболизма и создают условия для дисбактериоза (Г.И.Гончарова с соавт., 1989; В.А.Антипов, 1990, 1991; Т.Н.Грязнева с соавт., 1991; А.А.Воробьев с соавт., 1995; Н.И.Малик с соавт., 2001). Поэтому необходимы исследования в направлении поиска средств, оказывающих благоприятное воздействие не только на иммуногенез, но и нормализацию микробиоценоза кишечника, путем создания в нем благоприятного физиологического и биохимического режимов.В связи с вышесказанным целью нашей работы явилось: изучить состояние иммунного статуса, естественного микробиоценоза кишечника и минерального обмена спортивных лошадей на фоне активных физических нагрузок и разработать эффективные методы их коррекции медовыми композициями с прополисом и цветочной пыльцой.В задачи исследования входило:1. Изучить влияние медовых композиций с прополисом и цветочной пыльцой на состояние естественной резистентности и фагоцитоза спортивных лошадей со сравнительной оценкой:а) динамики активности лизоцима сыворотки крови;б) динамики бактерицидной активности сыворотки крови;в) динамики фагоцитарной активности нейтрофилов крови.82. Определить влияние медовых композиций с прополисом и цветочнойпыльцой на показатели Т- и В-систем иммунитета спортивных лошадей с учетом:а) динамики содержания Т-Е-РОК-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-супрессоров в крови;б) динамики содержания В-ЕАС-лимфоцитов в крови.3. Установить влияние медовых композиций с прополисом и цветочной пыльцой на показатели естественного микробиоценоза кишечника спортивных лошадей:а) динамику количества бифидобактерий и лактобацилл;б) динамику количества условно-патогенных микроорганизмов.4. Разработать эффективные методы коррекции минерального обмена в организме спортивных лошадей с применением меда, прополиса и цветочной пыльцы с учетом:а) динамики общего кальция в сыворотке крови;б) динамики микроэлементов в сыворотке крови (железа, цинка, меди и марганца).5. Изучить влияние прополиса, меда в комплексе с прополисом и меда с цветочной пыльцой на некоторые биохимические показатели спортивных лошадей:а) динамику содержания глюкозы в сыворотке крови;б) динамику содержания общего белка в сыворотке крови.Научная новизна исследований состоит в том, что впервые проведено изучение влияния медовых композиций с прополисом и цветочной пыльцой на показатели естественной резистентности, фагоцитоза, Т- и В-системы иммунитета, минеральный обмен, биохимические реакции и микробиоценоз кишечника спортивных лошадей на фоне интенсивной тренинговой нагрузки.9Практическая значимость работы. На основании показателей естественной резистентности, фагоцитоза, параметров Т- и В-систем иммунитета, состояния минерального обмена, биохимических реакций, микробиоценоза кишечника, с учетом влияния на организм меда и биологически активных продуктов пчеловодства - прополиса и цветочной пыльцы, теоретически и практически обоснована необходимость применения в спортивном коневодстве медовых композиций, как препаратов, обладающих хорошими иммунокорре-гирующими и иммуностимулирующими свойствами, способствующих созданию в организме животных иммунного баланса, восстановлению минерального обмена и микробиоценоза кишечника. Полученные данные позволяют рекомендовать их спортивному коневодству как эффективные средства. Основные положения диссертации, выносимые на защиту:1. Состояние естественной резистентности, фагоцитоза, Т- и В-систем иммунитета у спортивных лошадей, их коррекция медом в комплексе с прополисом и цветочной пыльцой.2. Оценка естественного микробиоценоза кишечника (нормофлоры и условно-патогенных микроорганизмов) и пути его коррекции медовыми композициями с прополисом и цветочной пыльцой.3. Состояние минерального обмена у спортивных лошадей при высокой интенсивности тренинговых нагрузок и пути его коррекции биологически активными продуктами пчеловодства.4. Изменение некоторых биохимических показателей крови (общего белка и глюкозы) при применении прополиса, меда и цветочной пыльцы в различных сочетаниях.Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены на республиканской научно-практической конференции молодых ученых и аспирантов (Уфа, 2003), на научно-практической конференции БГАУ (Уфа, 2004), международной научно-практической конференции «Современные10проблемы иммуногенеза, теории и практики борьбы с паразитарными и инфекционными болезнями сельскохозяйственных животных» (Москва-Уфа, 2004), на международной конференции «Пробиотики, пребиотики, синбио-тики и функциональные продукты питания. Современное состояние и перспективы» (Москва, 2004).Публикация результатов исследований. Основные положения диссертационной работы опубликованы в 10 научных статьях.Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 158 страницах компьютерного текста, включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследований, выводы и практические предложения. Работа иллюстрирована 22 таблицами и 21 рисунком. Список литературы включает 256 наименований, в том числе 73 иностранных авторов.^ 11 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ1.1 Биологические особенности спортивных лошадейС развитием индустрии конного спорта остро встала проблема поиска наиболее эффективных способов лечения и профилактики различных заболеваний лошадей. При интенсивных физических нагрузках организм лошади испытывает стрессовое состояние, снижается естественная резистентность и может возникнуть заболевание той или иной системы.Литературные материалы, посвященные исследованиям состояния естественной резистентности организма сельскохозяйственных животных, свидетельствуют о том, что специфическая и неспецифическая реактивность определяется различными, довольно динамичными показателями, которые определяются как генетическими особенностями организма, так и воздействием различных факторов внешней среды. Изменением силы и продолжительности воздействия того или иного фактора можно направленно влиять на формирование и проявление защитных сил организма (Санжаров В.А. с соавт., 1981; Пушкарева С.А., 1985).Умеренное действие различных нагрузок на организм животного тренирует системы защитных сил, расширяет их функциональные возможности, что в целом благоприятно сказывается не только на состоянии здоровья, но и на продуктивности (Сиротин Н.Н., 1981; Ширванян Т.А., 1981; Федоров Ю.П. с соавт., 1982; Карпуть И.М., 1983, Коромыслов П.Е., 1983).Биологическая сущность тренинга спортивных лошадей заключается в выработке полезных рефлексов, синхронности ритмов дыхания и движения и приспособлении мышечной, дыхательной и сердечно-сосудистой систем к выполнению необходимых функций при определенных физических нагрузках. Тренинг, систематически проводимый из поколения в поколение, — это12не только один из видов направленного воздействия на организм отдельной лошади, но и путь к совершенствованию всей породы. Правильно организованный тренинг ведет к всестороннему физиологическому развитию всех систем организма и созданию желательного типа лошади.Процессы активации неспецифических факторов защиты и иммунологической реактивности под влиянием различных нагрузок, не выходящих за рамки «физиологического стресса» были зарегистрированы у спортивных лошадей в период тренировок (Осидзе Д.Ф., 1983).Однако также установлено, что длительное непрерывное действие каких-либо неблагоприятных факторов (транспортировка, недостаточное и неполноценное кормление, нарушение способа и технологии содержания, несоответствующие зоогигиеническим нормам параметры микроклимата и т.д.) приводит к срыву адаптационных механизмов, снижению естественной резистентности, повышению восприимчивости животных к различным заболеваниям и уменьшению продуктивности.Исследователи пришли к выводу, что воздействие повышенных тренировочных (мышечных) нагрузок вызывает характерные для стресса изменения в активности симпатоадреналовой и гипофизарно-надпочечниковой систем. Подобные изменения наблюдали в организме лошадей при введении им АКТГ (Slone D.E., 1983). Кроме того, после мышечной работы в крови лошадей были выявлены характерные для стрессовой реакции изменения в морфологическом составе лейкоцитов: нейтрофильный лейкоцитоз, эозино-пения и лимфопения (Burquer P., 1983).В результате опытов было установлено, что различные виды тренинго-вых нагрузок вызывают в крови лошадей концентрации катехоламинов, глюкокортикоидов, инсулина (Show D. et al., 1981; Turner V. et al., 1989; KerrD., 1992).13При высоком уровне тренинга скаковых лошадей (интенсивная мышечная работа, работа под седлом, на корде, выступление в призу) были выявлены изменения в крови концентрации различных микроэлементов. Так, Со-dazza D (1984), установил, что в условиях неправильного режима тренировочных нагрузок наиболее значительно уменьшается содержание калия - на 19,4 %, магния - на 7,8 %, меди - на 8,0 %; выявлено достоверное падение содержания цинка в сыворотке крови.Не вызывает сомнения, что снижение уровня микроэлементов в крови лошадей при стрессах может стать фактором, лимитирующим работоспособность животного и стать причиной различных заболеваний.На основании сравнительных исследований по влиянию на организм лошади тренировочных нагрузок различной интенсивности многими авторами сделан вывод об однонаправленных реакциях исследуемых физиологических систем. Степень изменения концентрации различных ферментов и аминокислот в крови лошадей свидетельствует о значительной активации их организма на клеточном уровне. Причиной высокой ферментации может быть только напряженная мышечная работа или высокая степень утомления (Пушкарева С.А., 1985).Небольшие по силе или длительности нагрузки оказывают благоприятное действие на весь организм в целом и на иммунную систему в частности. При этом отмечают активизацию фагоцитоза, повышение продукции антител и т.д., что положительно сказывается на противоинфекционной защите и утилизации токсических продуктов обмена веществ. При увеличении длительности тренинга наблюдается угнетение общей иммунореактивности организма лошади (Яковлев И.Н., 1984).Стрессы различной природы, как и продолжительность и интенсивность их действия, могут усиливать или ослаблять факторы неспецифической ре-зистентности (лизоцим, бактерицидная активность сыворотки крови, фаго-14цитоз и др.), а также и специфический гуморальный и Т-клеточный иммунный ответ. Так, по данным Послова Г.А. (1999) транспортировка жеребят на расстояние 300 км снижала бактерицидную и лизоцимную активность сыворотки крови лошадей при низкой наружной температуре, соответственно на 25 и 21 %, а в летнее время - почти в 1,5 раза. Также обнаруживалось снижение фагоцитарной активности нейтрофилов и макрофагов.Исследованиями многих авторов установлено, что низкие гематологические показатели наблюдаются у быстроаллюрных лошадей как при недостаточной их тренированности, так и при чрезмерных нагрузках.А.А. Ласков с соавт. (1982) отмечают, что особое значение приобретают исследования функционального состояния лошади при перетренированности, которая по многим причинам имеет сходство с патологией. Основная причина перетренированности - нервно-психические воздействия. Перетренированность наступает тогда, когда пытаются повысить результаты путем нерационального увеличения напряжения в тренировке. Она, как правило, наступает в период соревнований при чрезмерном применении резвых работ, нарушении чередования отдыха и работы, неполноценном кормлении и т.п.Снижение показателей работоспособности в скачке или на резвых галопах хотя и является хорошо распознаваемым признаком перетренированности, но по существу это уже запоздалый симптом. Поэтому важна более ранняя диагностика этого состояния, что предотвращает снижение работоспособности и появление признаков хронического переутомления. При этом особое внимание, как замечает ряд авторов (Анке М., 1984; Зенкович Е.И., 1993; Дорофеев В.Н., 1995) следует уделять двухлетним лошадям, организм которых еще недостаточно окреп.Многолетние наблюдения показывают (Милн Д.В., 1982; Ласков А.А., Пушкарева С.А., 1984; Неустрокев М.П., Малышева В.И., 1995; Allen В. et al., 1984), что выдающиеся скакуны имеют те или иные отклонения в сер-15дечно-сосудистой, иммунной системах. Опасность заключается в том, что порой незначительные отклонения в состоянии здоровья при больших нагрузках могут привести к серьезным нарушениям патологического характера, возникновению перетренированности и перенапряжению, снижают работоспособность.Ветеринарно-врачебный контроль за гематологическими и иммунными показателями необходим не только для проведения профилактических и лечебных мероприятий, но и для помощи тренеру в рациональном планировании тренинга спортивных лошадей.В.П.Попов (1984), Капунцов Д.Ю. (1987), Е.И.Зенкович (1993) отмечают, что работа со спортивными лошадьми должна быть направлена на обеспечение необходимой биологической полноценности рационов на всем протяжении тренинга и испытаний. Автор исследовал влияние балансирующих витаминно-минеральных добавок на протекание обменных процессов в организме лошадей и уровень гуморальных факторов естественной резистент-ности на фоне традиционного сено-овсяного кормления. Уже через 30 дней применения добавки у лошадей в крови возросло содержание гемоглобина, а сыворотка крови характеризовалась более высокими показателями бактерицидной активности, лизоцима, уровнями общего белка, его альбуминовой фракции и минеральных веществ, что указывает на высокую лабильность организма лошади в ответной реакции на комплексное применение биологически активных соединений.Снижение неспецифических защитных сил организма может тормозить развитие специфического иммунного ответа при введении профилактических препаратов.Под влиянием антгельминтных препаратов происходят нарушения в установившемся биоценотическом гомеостазе желудочно-кишечного тракта. Так, Третьяков A.M. (2001), исследовав микрофлору желудочно-кишечного16тракта у лошадей до и после дегельминтизации установил, что при применении аверсекта-2 соотношение между полезной и условно-патогенной микрофлорой кишечника уменьшается в 2,7 раза, полностью не восстанавливаясь еще в течение двух недель после обработки.Сергиенко Г.Ф. (1999), проведя обследование лучших троеборных лошадей России, выступавших в крупных соревнованиях - Кубке России заключил, что на этом этапе подготовки (конец подготовительного - начало соревновательного периода) уровень их общей тренированности недостаточен. Все наиболее информативные показатели крови (СОЭ, содержание гемоглобина, активность фермента альдолазы, флокуляция, фракционный состав белков и др.) значительно уступают модельным характеристикам хорошо подготовленных спортивных лошадей на этой стадии годового тренировочного цикла. Автор показывает, что успех выступления в троеборье на фоне низкого уровня общей тренированности лошадей определяется, главным образом, технической подготовкой лошадей.Естественные защитные силы организма лошадей в значительной мере зависят от полноценности кормовых рационов. Важная составная часть рационов — биологически активные соединения, прежде всего — балансирующие витаминно-минеральные подкормки (В.М. Дикун, 2000).Витамины являются незаменимыми регуляторами обменных процессов организма. Каждый из них обеспечивает свои специфические жизненные функции. Поэтому, недостаток одного или нескольких витаминов может вызвать нарушение деятельности всего организма и повлечь серьезные заболевания.В оптимальных условиях потребность в витаминах должна обеспечиваться за счет естественных кормов и отчасти за счет их синтеза в организме животного. Но в результате недостаточно сбалансированного, а иногда недоброкачественного кормления, стрессовых факторов, инфекционных заболеваний и других причин, потребность животных в витаминах возрастает и полностью не17удовлетворяется. В этих случаях чтобы сохранить животное здоровым и продуктивным, следует прибегать к использованию витаминных добавок.Последниее исследования показали, что многие микроэлементы, присутствующие в кормах, составляющих рацион спортивных лошадей, плохо всасывается в пищеварительном тракте. В некоторых случаях животные могут использовать только 10-20 % элементов, содержащихся в растительных кормах. Поэтому подкормка лошадей минеральными добавками в период предиппо-дромного тренинга повышает уровень их выносливости, что подтверждает улучшение клиникофизиологических показателей, по которым можно с достаточно высокой достоверностью прогнозировать скаковую карьеру лошадей (Йокохама М., 1985).В.П. Попов, Л.В.Зиновьева (1984) изучали влияние скармливания одной из витаминных подкормок на обменные процессы у лошадей и сопротивляемость их организма заболеваниям в весенний период, когда ввиду снижения качества кормов в них недостает отдельных питательных веществ. Авторы установили, что использование сыпучих форм витаминов, микроэлементов вместе с пшеничными отрубями приводит к увеличению содержания гемоглобина, а в сыворотке крови - количества альбуминовой фракции белка и минеральных веществ (макро- и микроэлементов), что указывает на высокую лабильность организма лошади в ответной реакции на комплексное применение биологически активных соединений. Применение балансирующей добавки оказало наибольшее влияние на бактерицидную активность сыворотки крови, характеризующую суммарное действие гуморальных факторов естественного иммунитета. Так, у лошадей опытной группы этот показатель через 120 дней применения балансирующей добавки составил 57,3 % против 46,7 % у лошадей контрольной группы.Список литературы