сердечные гликозиды

СЕРДЕЧНЫЕ ГЛИКОЗИДЫ Сердечными гликозидами называются гликозиды, агликоном которых являются производные циклопентанопергидрофенантрена, содержащие в положении 17 ненасыщенное пятичленное или шестичленное лактонное кольцо и оказывающие специфическое действие на сердечную мышцу. Сердечные гликозиды пока не имеют себе равных синтетических заменителей, растения служат - единствен¬ным источником их получения. Действие сердечных гликозидов проявляется в изменении всех основных функций

сердца. Под влиянием терапевтических доз сердечных гликозидов наблюдается: усиление систолических сокращений сердца, удлинение диастолы, понижение возбудимости приводящей системы сердца. В зависимости от заместителя в положении 10 карденоли, подразделяются на три подгруппы. Первая подгруппа — подгруп наперстянки; к ней относятся гликозиды, агликоны которых в ложении 10 имеют метильную группу (—СН3). Гликозиды этой группы медленно всасьгваются и медленно выводятся из организма

обладают кумулятивным действием: с ни Дигитоксигенин. Вторая подгруппа — подгруппа строфанта включает сердечные гликозиды, агликон которых в положении 10 имеет альдегидную группу {—С^ ). Эти гликозиды быстро выводятся из организма, не обладают кумулятивным действием: сн, он Строфантидин. Третья подгруппа объединяет сердечные гликозиды, имеющие в положении 10 спиртовую группу (—СНаОН): °") НОН2С - ' ^^ он

Геллебригенол. Сердечные гликозиды можно еще классифицировать по количеству сахарных остатков в углеводной части молекулы. Их можно разделить на монозиды, биозиды, триозиды и т. д. Физико-химические свойства Сердечные гликозиды представляют собой в большинстве случаев кристаллические вещества бесцветные или беловатые, иногда с кремовым оттенком, не имеющие запаха и обладающие горьким вкусом. Они характеризуются определенной точкой плавления углом вращения.

Многие сердечные гликозиды обладают специфической флуоресценцией в УФ свете. Например, ланатозиды напстянки шерстистой имеют следующие свечения в УФ свете: ланатозид А — желто-зеленое; ланатозид В — голубовато-зеленое, ланатозит-С — голубое. Большинство сердечных гликозидов мало растворимы в этиловом спирте хлороформе, петролейном эфире, в воде, но хорошо растворимы в водных растворах метилового и этилового спиртов.

Чем длиннее сахарная цепочка, тем лучше растворяются сердечные гликозиды. Агликоны же сердечных гликозидов лучше растворимы в органических растворителях. Сердечные гликозиды легко могут подвергаться гидролизу (гидролиз может быть кислотным, щелочным и ферментативным). Наиболее мягкое, ступенчатое расщепление протекает при ферментативном гидролизе. Из первичных, нативных гликозидов при ферментативном гидролизе образуются вторичные, которые отличаются

длиной углеводной цепи. Например, при ферментативном гидролизе агликозида. А вначале образуется дигитоксин и отщепля¬ли молекула глюкозы, а затем образуются дигитоксигенин и молекулы дигитоксозы. При кислотном или щелочном гидролизе сразу происходит глубокое расщепление до агликона и сахарных компонентов. Методы выделения При выделении сердечных гликозидов используются органические растворители (этиловый, метиловый спирты), которые не вызывают гидролиза сердечных гликозидов, а если

нужно получать не нативные, а вторичные гликозиды, то заранее проводят фермента¬ции и гидролиз. Извлечение сердечных гликозидов из растительного сырья можно разделить на следующие этапы: 1) экстракция сердечных гликозидов растительного сырья; 2) очистка полученного извлечения; 3) разделение суммы сердечных гликозидов; 4) перекристаллизация индивидуальных сердечных гликозидов.

Основная трудность при выделении сердечных гликозидов заключается в том, что это крайне лабильные соединения, а поэтому малейшее нарушение в температурном режиме приводит к их разрушению. Экстракцию сердечных гликозидов из растительного сырья чаще проводят метиловым или этиловым спиртами (концентрация 80 %). Полученное спиртовое извлечение, содержащее сумму типичных гликозидов, подвергают очистке от сопутствующих веществ. Сопутствующими веществами бывают пигменты (хлорофилл, каротиноиды),

смолы и другие органические вещества растворимые в спиртах. Для отчистки упаренное под вакуумом (при температуре 51) спиртовое извлечение подвергают многократной обработке техническими растворителями, чаще всего четыреххлористым углеродом до полного удаления сопутствующих веществ или же применяют сорбционные методы очистки, используя оксид алюминия, который наносится на стеклянные фильтры, Разделение суммы сердечных гликозидов проводят чаще всего на хроматографических

колонках, заполненных сорбентами (оксид алюминия, силикагель). В дальнейшем нужные зоны элюируют опре¬деленными растворителями. Так, для нативных гликозидов напер¬стянки элюирование проводят смесью хлороформа с изопропиловым спиртом (3*Л). Полученные элюаты выпаривают под вакуумом до¬суха при 2 = 51— 52 °С, затем проводят перекристаллизацию до получения индивидуально чистых веществ. Для установления строения сердечных гликозидов использу¬ются

различные физико-химические методы: УФ, ИК, ЯМР-спектроскопия и др. Так в УФ области спектра пятичлениое лактонное кольцо вы¬зывает интенсивное поглощение при 215—220 нм, а ИК область ха¬рактеризуется расщепленной полосой, при 1750 см-1 (—С=О группа) и полосой при 1625 см-1 {—С~С-связь). Отсутствие строго специфических реактивов на шестичленное лактонное кольцо требует снятия для этих веществ УФ спектров, где они показывают характерную полосу поглощения при 300 ш.

Поглощение в этой области использовано также для проявления хроматограммы при облучении УФ светом с длинами волн 290— 360 нм. В ИК области спектра шестичленное лактонное кольцо характеризуется интенсивной полосой поглощения при 1730 см"1 (С=О-группа) и двумя полосами при 1640 и 1540 см^1 (сопряженные С=С-связи). Большое значение для выяснения строения вещества имеет ус¬тановление в нем числа спиртовых групл и числа ацетилирующихся из них, т. е. первичных и вторичных.

Общее число ОН-групп можно установить либо методом Церевитииова (определение активного во¬дорода), либо с помощью И К спектроскопии. Однако первый метод требует значительного количества вещества и поэтому, в основном, используется метод ИК спектроскопии, при использовании которого достаточно 1—2 мг вещества. К сожалению, применение этих методов в отношении сердечных гликозидов и агликонов встречает препятствия.

Главное из них то, что карденолиды и буфадиенолиды, будучи высокомолекулярными многоатомными спиртами, дают сложные для идентификации спектры. Качественное определение Несмотря на отсутствие строго специфических реакций, при¬менение следующего комплекса проб позволяет сделать заключение о наличии сердечных гликозидов. Качественные реакции проводятся либо с индивидуальными веществами, либо с очищенным извлече¬нием из

растительного сырья. Для этого несколько капель извле¬чения упаривают досуха на часовом стекле или в выпарительной чашке, а сухой остаток растворяют в нужном растворителе. Все реакции на сердечные гликозиды можно разделить на группы: 1) реакции на углеводную часть молекулы (2-дезоксисахара) (реакция Келлер — Килиани); 2) реакции на стероидное (реакция

Либермана — Бурхарда; реакция Розенгейма и другие реакции на лактонное ненасыщенное кольцо. Для установления наличия пятичленного лактонного кольца проводятся реакции: Легаля (с нитропруссидом натрия); Раймонда (с динитробензо¬лом); Кедде (с 3,5-динитробензойной кислотой); Балье (с пикрино¬вой кислотой). Реакции проводятся в щелочной среде. На щестичленное лактонное кольцо не найдены достаточно специфические

реактивы. Для обнаружения буфадиенолидов на хроматограммах используют 20%-ный раствор треххлористой сурьмы в хлороформе, Методики качественных реакций. Приготовление извлечния: 5 г измельченных листьев наперстянки заливают 50 мл 80%-ного этилового спирта, настаивают 24 ч. Спирт отгоняют под вакуумом, водный остаток промывают в делительной воронке четыреххлористым углеродом 6 раз по 10 мл. Сердечные гликозиды извлекают смесью хлороформ — изопропиловый спирт (3:1) 4

раза по 10 мл. К полученному извлечению добавляют 2 г безводного Na2SO4, дают постоять 3—5 мин, а затем отфильтровывают через бумажный фильтр. Качественные реакции. Реакция Келлер — Кили¬ани. Готовят два раствора: 1 — ледяная уксусная кислота, содер¬жащая следы Fe2(SO4)3; 2 — концентрированная серная кислота также со следами Fe2(SO4)3. Сухой остаток очищенного извлечения растворяют в растворе 1 и осторожно по стенке

пробирки вливают раствор 2. При наличии дезоксисахара верхний слой через некото¬рое время окрасится в васильково-синий цвет. Реакция Либермана—Бурхарда. Сухой оста¬ток очищенного извлечения растворяют в ледяной уксусной кислоте и добавляют смесь уксусного ангидрида и концентрированной сер¬ной кислоты (50:1). Через некоторое время развивается окраска от розовой к зеленой и синей.

Реакция Розенгейма. Сухой остаток очищенного из¬влечения растворяют в хлороформе и смешивают с 90%-ным вод¬ным раствором трихлоруксусной кислоты. Появляются сменяющие друг друга окраски от розовой до лиловой и интенсивно синей. Реакция Легаля. Готовят два раствора: 1) 5%-ный раствор нитропруссида натрия; 2)10%-ный раствор едкого натра. Сухой остаток очищенного извлечения растворяют в 0,5 мл 100% метилового спирта.

Полученный раствор вливают в пробирку и добавляют 1—2 капли раствора 1. Затем, осторожно (не взбалтывая) по стенке добавляют 1—2 капли раствора 2. На границе 2 растворов появляется красное окрашивание в виде кольца. Количественное определение До настоящего времени не представлялось возможным установить содержание того или иного сердечного гликозида в присутствии других, так как реактивы, предложенные для количественного

определения гликозидов, являются общими. Поэтому весьма перспективным считается сочетание хроматографии с дальнейшим ис¬пользованием фотометрии, потенциометрии, полярографии, флуориметрии и др. Хорошие результаты получают при хроматографии на бумаге, пропитанной формамидом. В этом случае применение систем бен¬зол — хлороформ (9:1); (7:5); (3:7) или смесей толуол — н-бутанол (9:1); (4:1); (2:1); (1:1), смесей состава этилацетат — бензол — вода (84:16:50), хлороформ — бензол

— к-бутанол (78:12:5} или просто хлороформа в качестве подвижной фазы позволяет достичь четкого разделения отдельных групп гликозидов. В последние годы также широко используется тонкослойная хроматография. В каче¬стве сорбента могут применяться тальк, силикагель, кизельгур и др. Системы используются такие же, как для бумажной хроматографии. Для обнаружения гликозидов на хроматограммах применяют реактивы» вызывающие флуоресценцию или окрашивание.

Наибо¬лее широко применяют смесь 25%-ной трихлоруксусной кислоты и 3%-ного раствора хлорамина в этиловом спирте (15:1). В УФ свете производные дигитоксигенина дают четкую золотисто-желтую флуо¬ресценцию; гитоксигекина — голубую; дигоксигенина — стальную. Для количественного определения наиболее простыми и доступ¬ными считаются фотометрические методы — фотоколориметрия и спектрофотометрия сердечных гликозидов и их генинов в видимой области спектра. Эти методы основаны на цветных реакциях сер¬дечных гликозидов с различными

нитросоединениями или ксантгидролом. Для при¬готовления эталонного раствора можно использовать кристалли¬ческие гликозиды, но ввиду трудности их получения были реко¬мендованы также растворы дихромата калия и сульфита натрия. Флуориметрические методы основаны на способности сердечных гликозидов флуоресцировать под действием сильных кислот (кон¬центрированные серная, фосфорная кислоты) и окислителей (пер¬хлорат железа, хлорное железо) после кратковременного облуче¬ния УФ светом.

Эти методы применимы только к сердечным гликозидам, которые в результате дегидрирования образуют моно и диангидросоединения. В основе полярографических методов определения сердечных гликозидов лежит их способность восстанавливаться на ртутно-капельном электроде при потенциалах (1,9—2,0В) образуя диффуз¬ные токи, волны которых пропорциональны концентрации сердеч¬ных гликозидов. В последние годы для количественного определения сердечных гликозидов стал применяться метод газожидкостной

хроматогра¬фии (ГЖХ). При этом вначале сердечные гликозиды превращают в летучие производные путем силилирования, ацетилирования и получения гептафторбутиратов, а затем подвергают анализу. Нормативно-техническая документация на лекарственное расти¬тельное сырье, содержащее сердечные гликозиды, наряду с физико-химическими методами количественного определения требует обя¬зательной стандартизации сырья биологическими методами. По требованиям ГФ X биологическая стандартизация сердечных гликозидов

проводится на лягушках, кошках и голубях. Актив¬ность оценивают по сравнению со стандартным кристаллическим препаратом и выражают в единицах действия (лягушачьих, коша¬чьих и голубиных). Одна лягушачья единица действия (ЛЕД) соответствует наи¬меньшей дозе стандартного препарата, вызывающей систолическую остановку сердца стандартной лягушки (лягушка-самец массой 8—33 г) в течение 1 ч, если испытывают сырье и препараты напер¬стянки, ландыша и горицвета, или 2 ч, если испытывают сырье м препараты

строфанта, желтушника и олеандра. Под одной ко¬шачьей или голубиной единицей действия (1 КЕД или 1 ГЕД) подразумевают дозу стандартного препарата из расчета на I кг массы животного. В НТД на лекарственное растительное сырье, содержащее сер¬дечные гликозиды, обязательно указывается валор. Валор сырья — по количество единиц действия в 1 г сырья. Наиболее часто используется стандартизация на лягушках.

К основным недочетам этого метода относятся следующие: 1) иссле¬дования проводятся на холоднокровных животных, генетически далеко отстоящих от человека; 2) определяется смертельная доза, тогда как для клиники важно правильно определить терапевтиче¬ские дозы; 3) лягушки используемых видов распространены не во всех районах нашей страны и не во всех странах; 4) малая точность метода (± 20—25 %) ввиду резко изменяющейся чувстви¬тельности лягушек в зависимости

от времени года и других условий. Метод биологической стандартизации на кошках, принятый ГФ X, более точен (5—10 %), но также достаточно трудоемок. Методики количественного определения. Ни один из вышеперечисленных методов количественного определения сердечных гликози¬дов не является идеальным, каждый имеет свои недостатки. Коли¬честве иное определение таких лабильных веществ, как сердечные гликозиды, нуждается в индивидуальном

подходе в каждом конкретном случае. Методика количественного определения ланатозидов А, В, С в листьях наперстянки шерстистой — Folium Digitalis lanatae. Методика основана на хроматографическом разделении сердечных гликозидов с последующим спектрофотометрическим определе¬нием. 5 г измельченного сырья (точная навеска) (сито с диаметром отверстий 1 мм) помещают в склянку темного стекла с притертой пробкой, заливают 50 мл 80%-ного метилового спирта и настаивают и

течение 24 ч. Жидкость отфильтровывают на воронке Бюхнера и берут для исследования 40 мл извлечения (что соответствует 4 г сырья). Извлечение упаривают на водяной бане под вакуумом при температуре 50—60 °С до удаления спирта. К оставшемуся объему 4 мл, добавляют 5—7 мл воды и помещают в делительную воронку. Водный раствор очищают четыреххлористым углеродом 5 раз по 10 мл. Из очищенного водного раствора гликозиды извлекают смесью хлороформа и изопропанола (3:1) 4 раза порциями

по 10 мл. Полноту извлечения гликозидов контролируют реакцией Легаля. Хлороформно-изопропанольное извлечение обезвоживают сульфатом натрия и фильтруют через бумажный фильтр. Сульфат натрия на фильтре промывают 5 мл обезвоженной смеси, которую присоединяют к фильтрату и отгоняют досуха под вакуумом на во¬дяной бане при 50 °С. Сухой остаток количественно переносят на откалиброванный пикнометр вместимостью 3 мл с помощью смеси

хлороформ — метиловый спирт (1:1). Полученный раствор подвер¬гают хроматографированию. Хроматография проводится в тонком слое сорбента (тальк). На подготовленной хроматографнческой пластинке размером 13 X х 18 см намечают стартовую линию па расстоянии 1,5 см от нижнего края. На стартовую линию пипеткой с оттянутым на капилляр носиком наносят два пятна раствора гликозидов по 0,01

мл и пятно (0,01 мл) — раствор абищша («свиде¬тель»). Пластинку помещают в камеру » хроматографируют восходящим способом 30—35 мин. Длина пробега по¬движной фазы 12 см. В качестве подвижной фазы используется система: хло¬роформ — этиловый спирт — бензол — формамид (59 : 10 : 30) Пластинку высушивают на воздухе 20 мин, затем 10 мин в сушильном шка¬фу при t = 120 °С. Одну половину пластинки (пятно «свидетеля» и пятно извлечения) обрабатывают 25%-

ным раствором трихлоруксусной кислоты в этиловом спирте с добавлением 0,2 % хлорамина. После обработки пластин¬ку высушивают 10 мин в сушильном шкафу при t = 120 °С .Ланатозиды проявляются синего цвета. Точные границы устанавливают в ультрафиолетовом цвете. Ланатозид А обладает ярко-желтой флуоресценцией; В — зеленовато-голубой; С — голубой. На второй половине пластинки (необработанной) пятна ланатозидов отмечают по проявленной

полосе и стандарту. Радиус пятен ланатозидов в этой системе: А —0,74; В —0,43; С — 0,24. Посте установления границ пятна ланатозидов А, В, С сни¬мают с пластинки, количественно переносят па стеклянный фильтр № 4 и элюиругот 20 мл смеси хлороформ — метиловый спирт (1: 1). Элгоат упаривают досуха на водяной бане под вакуумом t 50-60С. К сухому остатку добавляют 5 мл ксантгидро- реактива, нагревают 5 мин на кипящей водяной бане, охлаждают 5

мин в холодной воде и выдерживают 15—20 мин при комнатной температуре. Появляется окрашивание от розовых до малиновых тонов. Окрашенный раствор помещают в кювету толщи¬ной 1 см и определяют оптическую плотность на спектрофотометре СФ-4А на фоне контроля. Контролем слу¬жит алюат с чистого сорбента, калибровочный график строят по ланатозиду С (целаниду), процентное содержанке ланатозида в абсолютно сухом сырье рассчитывается по формуле:

X = 1,05аV1 10/V2m10, где а -количество вещества, найденное по калибровочному гра¬фику V1- объем экстракта, мл (пикнометр); V2 - объем экстракта, нанесенного на пластинку, мл; m- масса навески абсолютно сухого сырья, 1,05 — поправочный коэффициент. Подготовка хроматографических пластинок. 4 г. талька помещают в колбу на 25 мл, приливают 7 мл 95%-ного этилового спирта и 1 мл смеси формамид— ацетон (3:7).

Смесь взбалтывают 30-40 секунд и выливают на пластинку, равномерно распределяя по всей площади. Пластинку высушивают на воздухе 20-25 мин и 10 мин в сушильном шкафу при t50-60 С.Для хроматографии необходимы только свежеприготовленные пластинки. Подготовка камеры для хроматографирования. В качестве подвижной фазы используют систему 95%-ный этиловый спирт — бензол — хлороформ — формамид (10:30:59:1).

Систему помещают в делительную воронку и взбалтывав 10 мин. затеи отстаивают 10 мин. Заливают в камеру так, чтобы верхний слой формамида не попал в камеру. Насыщение камеры идет 20— 25 мин. Для лучшего насыщения камеры стенки выкладываются фильтровальной бумагой. Снаружи камера должна быть закрыта черной бумагой. Систему необ¬ходимо менять при последующем хроматографировании:

1)Приготовление ксантгидролового реактива. 10мл ксантгидрола растворяют в 99 мл ледяной уксусной кислоты и добавляют 1 мл концентрированной НCl. 2) 25% раствор трихлоруксусной кислоты с добавлением 0,2% хлора¬мина Т готовится непосредственно перед проявлением. 3)Проведение реакций Легаля готовится 2 раствора, 1-5%раствор нитропруссида натрия (готовится в мерной колбе) и 2- 10% раствор едкого натра(водный).В выпарительной чашке 3—4 капли извлечения упаривают досуха,растворяют в метиловом

спирте. Растворенный сухой остаток вливают в пробирку и добавляют1-2 капли реактива 1 затем осторожно по стенке добавляют1—2капли реак¬тива 2 и, не взбалтывая, смотрят. Если есть сердечные гликозиды, то по гра¬нице 2 растворов появляется красное окрашивание в виде кольца. 4)Построение калибровочного графика. Калибровоч¬ный график строится по стандартному раствору ланатозида С (целанида),25мг целанида растворяют в 25 мл смеси метиловый спирт— хлороформ(1:1)в мер¬ной колбе.

Наносят на хроматографическую пластинку в количестве от 0,01до0 08 мл раствора, а далее поступают как с испытуемым извлечением. Реактивы и оборудование: метиловый спирт (метанол): четыреххлористый углерод; азопропиловый спирт (изопропанол); хлороформ; ацетон; формамид- Na2SО4 (безводн.) тальк, этиловый спирт (этанол); ксантгцдрол; три. хлоруксусная кислота- хлорамин Т; НС1 (конц.): уксусная кислота (лед.): бен-зол; NaOH 10%, нитропруссид натрия 5% абицина раствор в

смеси ме¬тиловый спирт - хлороформ (1:1) Определение оптической плотности окрашенного раствора можно прово¬дить па фотоколориметре ФЭК 56М при зеленом светофильтре (длина волны 540 ) Склянки темного стекла с притертой пробкой вместимостью 100 мл- воронки Бюхнера, колбы Булзена; колба с нормальным шлифом вместимостью 50 мл-штопка делительная вместимостью 200 мл; цилиндры мерные на 50 и 10 мл колбы плоскодонные вместимостью 25, 100 и 250 мл; колбы мерные вместимостью 25

мл стеклянные для фильтрований диаметром 5 см; пикнометр вместимостью мл: мякропипегка измерительная вместимостью 0,1 мл; пластинки стеклянные для 1LX размером 13 X 18 см; пробирки стеклянные; холодильник стеклянный -лабораторный с нормальным шлифом; бюретка с притертым краном вместимостью Лл мл; камера яронатотрафитеская для ТСХ; пульверизатор; игла препароваль¬ная; фильтры бумажные; штативы лабораторные.

Методика количественного определения главных сердечных гликозидов в листьях ландыша (Folium Convallariae). Методика основана на хроматографическом разделении и последующем спектрометрическом определении сердечных гликозидов. строфантидик строфантидик строфантидик строфантидик В круглодониую колбу вместимостью 250 мл, снабженную кратным холодильником, помещают 60 мл 70%-ного этилового спирта и нагревают до кипения. Затем быстро вносят 5 г измельченных (сито с«диаметром отверстий 3

мм) сухих листьев ландыша и кипятят 30 мин. Раствор охлаждают и доводят до первоначальной массы 70%этиловым спиртом. Полученный экстракт фильтруют, отбирают 27,5 г (что соот¬ветствует 2,5 г сырья) и отгоняют спирт под вакуумом при i = — 55—60 °С К теплому экстракту добавляют 3 мл раствора основно¬го ацетата свинца, перемешивают 10 мин, затем центрифугируют 5 мин при скорости 5000 об/мин. Промывают осадок 2 раза, при¬бавляя по 10 мл воды с последующим центрифугированием.

Из очищенного вод¬ного экстракта сердечные гликозиды из¬влекают смесью хлороформ — метиловый спирт (4 ; 1). Экстракт фильтруют через безводный сульфат натрия, промывают фильтр. Из экстракта отгоняют растворитель в ваку¬уме на водяной бане до объема 3—Ф мл. Затем раствор гликозидов упаривают до 1 мл, остаток высушивают. Сухой остаток . растворяют в 1 мл смеси хлороформ — метиловый спирт (1 :

I). Хроматографи-руют на бумаге восходящим способом в системе этилацетат — вода (2:1) в тече¬ние 20—24 ч. Происходит разделение конвалятоксина и дезглюкохейротоксина. Если хроматографировать нисходящим способом, то происходит разделение конваллозида, локундьезида и конваллятоксола. Проявитель — насыщенныйраствор треххлористой сурьмы в метиловом спирте. Пятна глико¬зидов окрашиваются в розово-фиолетовый цвет.

Элюиругот метиловым спиртом. Растворитель отгоняют под ваку¬умом. Остаток растворяют в метиловом спирте, прибавляют пикрат натрия отфильтровывают и измеряют оптическую плотность. Конт¬ролем является смесь тех же количеств метилового спирта и пикрата натрия. Измерение оптической плотности проводят на спект¬рофотометре при длине волны 494 нм в кювете толщиной 1 см. С помощью градуировочного графика стандартного конваллятоксина определяют содержание гликозидов

в мл элюата. Технология получения препаратов. Адонизид (Adonisidura) получают из травы адониса весеннего (горицвета или черногорки) (Adonis vernalis L.). Технология препарата разработана Ф. Д. Зильбергом (ВНИХФИ). Измельченную траву адониса весеннего (активность не менее 50—66 ЛЕД в 1 г) экстрагируют циркуляционным способом в аппарате типа Сокслета. В качестве экстрагента используют смесь, состоящую из 95 частей хлороформа и 5 частей 96%

этанола по объему. Указанный экстрагент получил название универсального, так как относительно хорошо извлекает все сердечные гликозиды. В то же время сопутствующие гидрофильные вещества переходят в эту смесь в незначительных количествах. Экстракцию растительного сырья проводят до полного извлечения гликозидов. В полученном извлечении наряду с гликозидами (адонитоксин, цимарин и др.) содержатся хлорофилл, органические кислоты, смолоподобные вещества и др. Отделение суммы гликозидов от основной массы гидрофобных сопутствующих

веществ осуществляют путем смены растворителя. Для этого из полученного извлечения отгоняют экстрагент при температуре не выше 60 °С и разрежении не менее 59994,9 Н/м2. Когда кубовый остаток в испарителе по массе приблизительно будет равен взятому сырью, к нему добавляют равное количество воды и продолжают упаривание до полного удаления хлороформа и этанола. При этом в осадок выпадают нерастворимые в воде вещества (хлорофилл, смолы и др.).

Водный раствор, содержащий сумму гликозидов, небольшое количество пигментов и других сопутствующих веществ, сливают с осадка и фильтруют на нутч-фильтре через двойной слой фильтровальной бумаги и слой алюминия оксида толщиной 1—1,5 см. Эту операцию применяют для удаления оставшихся в растворе сопутствующих веществ, причем алюминия оксид практически не адсорбирует сердечные гликозиды и они переходят в фильтрат. Библиографический список. 1.Н.И.Гринкевич; Л.Н.Сафроныч.

Химический анализ лекарственных растений.Москва «Высшая школа»1983г. 2.Машковский.М.Д.Лекарственные средства. «Новая волна»2005г. 3.И.Э.Акопов. Важнейшие лекарственные растения и их применение. «Медицина»1990г. 4.М.Д.Машковский; Э.А.Бабаян; А.Н.Обоймакова; В.М.Булаев. Государственная фармакопея СССР. »Медицина»Москва1989г.

План. 1.Введение. 2.Физико-химические свойства. 3.Методы выделения. 4.Качественное определение. 5.Количественное определение. 6.Технология получения препаратов из растений, содержащих сердечные гликозиды. 7.Библиографический список.