Диагностика беременности кобыл. Методы диагностики. Клинические методы диагностики.
Рефлексологическая диагностика беременности и бесплодия. Проводится ежедневно на протяжении 20–25 дней с 3–4-го дня после осеменения. Можно пользоваться ручной пробой – подведением пробника к самке или одну несколько маток выпускать в варок со стреноженным жеребцом и вести наблюдение.
Методика наружного наблюдения. При осмотре или исследовании кобыл необходимо знать, что лошадь может укусить, ударить передними или задними конечностями и прижать к стене. При подходе к лошади следует обращать внимание на ее поведение. Злые и строптивые животные в случае приближения к ним человека пригибают (прижимают) уши.
Не следует проводить исследование в станках или денниках. При групповых исследованиях для фиксации кобыл обычно ограничиваются поднятием передней конечности. Ее поднимает и удерживает на весу помощник. При исследовании беспокойных кобыл следует надеть на животное случную шейку или использовать вместо нее обычные вожжи.
Животное осматривают на открытом воздухе или в равномерно и хорошо освещенном помещении. Исследуемая кобыла должна стоять на ровном месте, опираясь на все конечности. Для осмотра следует встать на несколько шагов сзади крупа кобылы, с таким расчетом, чтобы плоскость, мысленно проведенная от лица исследующего, совпадала с медианной плоскостью туловища лошади. Такое расположение обследователя облегчает выявление изменений контуров живота.
У кобыл во второй половине жеребости заметно выпячивание левой брюшной стенки и заполнение левой голодной ямки. В конце жеребости нижний отдел левой брюшной стенки отвисает.
Иногда, чаще при проводке животного и особенно во время поения, можно наблюдать вздрагивания отдельных участков левой брюшной стенки, обусловленные движениями плода. Поение животного натощак холодно водой для обнаружения движения плода практиковать не следует (возможны аборты).
У бесплодного животного, вследствие расположения в правой половине брюшной полости толстых кишок, больше выпячивается правая брюшная стенка и заполнена правая голодная ямка.
К концу жеребости удается выявить более или менее значительное припухание периферических отделов задних конечностей, сглаженность складок вульвы и ее общее увеличение вследствие оттека. При осмотре сзади и сбоку наблюдают увеличение молочной железы. Складки кожи вымени несколько расправляются.
Отечность тканей подтверждается пальпацией. Рука, приложенная тыльной поверхностью к отечным тканям конечностей, вульвы или молочной железы, ощущает понижение местной температуры по сравнению с другими участками туловища, а при надавливании пальцем на отекшей поверхности образуется углубление, которое выравнивается лишь постепенно.
Из сосковых каналов выдавливается несколько капель тягучей, липкой, соломенного цвета жидкости («серка»).
При пальпации плода целесообразно ослабить напряжение брюшной стенки путем поворота головы животного налево и захватывания левой рукой кожи над холкой или над 10–13-м спинными позвонками. Иногда такое уменьшение напряжения достигается одним из этих приемов.
Для пальпации плода исследующий должен встать с левой стороны лошади, лицом к ее крупу, и, ухватившись левой рукой за холку, приложить ладонь правой руки к левой брюшной стенке по линии, мысленно проведенной от коленного сустава к пупку. Давлением руки брюшная стенка оттесняется внутрь. Быстро ослабляя давление, но оставляя руку на поверхности кожи и несколько нажимая на нее, исследующий при наличии плода ощущает толчок твердого тела. Чтобы точно убедиться в присутствии плода, следует пальпировать несколько раз, смещая руку вверх, вниз и назад.
Ответный толчок обуславливается тем, что плод смещенный вверх к середине брюшной полости, вслед за ослаблением удавления руки возвращается в исходное положение. Применять толчки кулаком, а тем более удары не следует.
Перед аускультацией животное покрывают простыней или полотенцем и выслушивают сердцебиение плода в тех участках, которые подвергались пальпации. Удобнее пользоваться стетоскопом или фонэндоскопом.
Наружный метод диагностики беременности прост и выполним в любых условиях, но он позволяет ставить только положительный диагноз на беременность.
Вагинальный метод диагностики беременности. Разработка.
Система вагинального исследования кобыл посредством влагалищного зеркала в сочетании с микроскопией мазка из влагалищной слизи (метод Бенеш–Курасава). Исследование слагается из тактильных ощущений при введении зеркала и данных осмотра слизистой оболочки влагалища и шейки матки.
Перед исследованием животному на обе задние ноги или на одну левую накладывают путки; голову его приподнимают кверху, чтобы перенести центр тяжести на задние конечности и тем устранить возможность нанесения удара исследующему.
После обмывания половых губ одним из дезинфицирующих растворов медленно и плавно вводят во влагалище простерилизованное или профламбированное сухое влагалищное зеркало Полянского или Скаткина. После этого рукоятку зеркала сжимают так, чтобы вскрылись ветви. Кобылу устанавливают крупом к источнику света, чтобы отражаясь от никелированных ветвей зеркала, он освещал поверхность слизистой оболочки вагины и шейки матки, вдающейся обычно в просвет между ветвями зеркала.
У жеребых кобыл при введении зеркала ощущается сопротивление со стороны стенок вагины, обусловленное наличием на них сгустившейся липкой слизи. На поверхности извлеченного из влагалища зеркала можно видеть полосы или комки гомогенной, слегка мутноватой, серого цвета, липкой, легко скатывающейся в шарики массы.
С третьей недели после оплодотворения наблюдается бледность слизистой оболочки влагалища; ее поверхность матовая. (Следует учитывать, что при узком влагалище, большом влагалищном зеркале и длительных манипуляциях быстро появляются застойные явления от сдавливания венозных сосудов влагалища).Устье шейки матки плотно закрыто густой слизистой пробкой серого цвета. Шейка матки смещена вперед к переднему краю лонных костей (а иногда опускается в брюшную полость). Нередко она сдвигается вправо или влево.
Реакция влагалищной слизи в начале жеребости нейтральная, к концу третьей недели кислая.
Ректальный метод диагностики беременности.
Проверяют животных в теплом и просторном помещении. От работы в станках, узких помещениях, с неровным полом или загроможденных посторонними вещами лучше воздержаться: резкие движения животного могут причинить травму руки исследующего (вывих, перелом). Животное готовят к осмотру. Исследующий встает несколько слева от лошади, опираясь на круп левой рукой. Помощник отводит хвост в правую сторону. Погладив кожу ануса, осторожно, плавно, буравящими движениями приоткрыв анус, продвигают пальцы рук, сложенные в форме конуса в кишку. После этого следует расширить просвет ануса напряжением пальцев так, чтобы между ними образовалось щелевидное пространство. У животного происходит акт дефекации. Следует полностью освободить прямую кишку от содержимого.
Важно следить, чтобы с рукой в анус не втягивались волосы хвоста. Они вызывают раздражение слизистой оболочки прямой кишки, а на руке исследующего царапины, эрозии и другие повреждения кожи.
Кисть руки, введенная в анус, сначала попадает в ампуловидное расширение. Оно располагается в тазовой области, прикреплено соединительной прослойкой к костям таза и преддверию влагалища, образует самую неподвижную часть прямой кишки. Руку следует ввести глубже вперед. Вслед за ощущением простора ампуловидного расширения прямой кишки рука наталкивается на суженную часть, образующую несколько циркулярных складок и перегибов.
В большинстве случаев для свободной пальпации матки достаточно продвинуть в суженную часть кишки только 4 пальца, оставив большой палец в ампуловидной части. Исследования лучше начинать с яичников. Для этого рука продвигается до уровня 4–5-го поясничного позвонка. По достижению указанной глубины пальцы несколько сгибают и кисть руки отводят в область голодной ямки. В таком положении руку с согнутыми пальцами, вместе с покрывающей ее прямой кишкой, плавно продвигают вдоль брюшной стенки в сторону таза. По приближению к маклоку в руку опадает напряженный, идущий сверху вниз тяж-краниальный край маточной брыжейки (яичниковая связка) – или яичник, выделяющийся округлой формой и плотной консистенцией.
Исследования начинают с яичников. Они довольно большие, плотной консистенции и поэтому сравнительно легко обнаруживаются.
Найдя левый яичник и определив его состояние (величину, форму, консистенцию и пр.), отыскивают связку яйцепровода, которая тянется от яичника к верхушке рога матки и захватывают ее между ладонью и полусогнутыми пальцами. Скользящими движениями руки по рогу матки, от ее верхушки к телу матки, определяют величину, форму и консистенцию рога матки. По окончании пальпации рога матки, ощупывают тело и сразу же (не извлекая руки) переходят к исследованию правого рога матки и правого яичника.
Исследование маточных артерий. Порядок отыскания средних маточных артерий у кобыл такой же, как и у коров. Разница состоит лишь в том, что у коров средняя маточная артерия отходит от пупочной артерии, а у кобыл от наружной подвздошной артерии.
Методика установления диагноза. При ректальном исследовании кобыл могут быть выявлены признаки, характерные для жеребости и нежеребого состояния.
Признаки нежеребого состояния. У нежеребых кобыл яичники почковинойо или бобовидной формы, величиной 3*5 см. Левый яичник очень подвижен, находится на уровне маклока (несколько выше дна таза). Правый яичник менее подвижен, располагается непосредственно над маклоком.
Рога матки находятся в брюшной полости, от тела матки они расходятся в стороны и направляются вперед и вверх. Рога матки одинаковой величины, плоские и дрябловатые, при пальпации сокращаются и округляются. Шейка матки располагается на дне тазовой полости. Маточные артерии равномерно развиты и пульсируют с одинаковой силой.
Признаки жеребости. В зависимости от срока жеребости в половых органах при ректальном исследовании выявляют следующие признаки.
1 м е с я ц ж е р е б о с т и. Яичник со стороны беременного рога матки значительно увеличен за счет желтого тела, несколько опущен и менее подвижен. Желтое тело хорошо прощупывается. Рога матки становятся округлыми, приобретают некоторую упругость, асимметричны. Основание одного из рогов увеличено, имеет форму овального пузыря величиной с гусиное яйцо. В увеличенном участке рога содержится, примерно, 200 – 250 мл жидкости, но флюктуация не выдержана. При пальпации этот рог не сокращается. Рога матки лежат сверху кишечника.
Заключение об одномесячной беременности должно быть осторожным, особенно при диагностике жеребости у старых кобыл. Во всех сомнительных случаях исследование необходимо повторить через 10–14 дней.
2 м е с я ц ж е р е б о с т и. Связка яичника на стороне беременного рога матки натянута. Яичник опущен вниз и опущен к оси таза. Асимметрия рогов матки выражена отчетливо за счет увеличения не только основания рога, но и тела матки. Беременный рог примерно в 2 раза больше не беременного. Увеличенная часть матки достигает значительного размера. Отходящие от этого образования рога округлые, колбасовидные, по-прежнему лежат над кишечником. Небеременный рог не увеличен, но округлый. Отмечается утончение стенок беременного рога. При тщательной, осторожной его пальпации ощущается флюктуация. Околоплодной жидкости около 800 мл.
3 м е с я ц ж е р е б о с т и. Беременный рог больше небеременного в 3 раза. Матка представляет собой пузырь неправильной формы (с ответвлениями), величиной с небольшой арбуз. Отчетливо ощущается флюктуация в беременном роге, в теле матки и основании свободного рога; околоплодной жидкости около 2 л. В отдельных случаях при пальпации матки удается ощутить плод. Шейка матки занимает по отношению к оси таза несколько косое или продольное положение. Она плотной консистенции. Длиной примерно 6–8 см, а шириной – 4–6 см.
В этот период жеребости матку легко принять за наполненный мочевой пузырь. Чтобы избежать ошибки, необходимо осторожно пропальпировать матку и нащупать место расхождения рогов, а также выявить шейку матки и установить ее связь с плодным пузырем.
Яичники вместе с маткой опускаются глубже в брюшную полость, причем яичник со стороны беременного рога располагается на уровне и впереди лонного сращения.
4 м е с я ц ж е р е б о с т и. Матка размером с большой арбуз. При пальпации явно выделяются флюктуация. Широкая маточная связка беременного рога натянута. Широкая маточная связка беременного рога натянута. Шейка матки располагается на переднем крае дна тазовой полости. Почти всегда удается прощупать плод. Оба яичника опускаются до уровня дна таза или несколько ниже, они расположены близко один от другого. Диаметр средней маточной артерии со стороны беременного рога значительно больше диаметра одноименной артерии со стороны небеременного рога; ощущается слабая вибрация артерии.
5 м е с я ц ж е р е б о с т и. Матка более глубоко опущена в брюшную полость. Прощупать плод можно только при глубоком введении руки. Хорошо выражена вибрация средней маточной артерии со стороны беременного рога и обнаруживается слабая вибрация артерии на стороне небеременного рога матки. Остальные признаки те же, что и на четвертом месяце жеребости.
6 м е с я ц ж е р е б о с т и. Вся матка вместе с шейкой глубоко опустилась в брюшную полость и почти недоступна для пальпации. Трудно отыскать плод, так как он располагается на нижней стенке живота. Только у небольших и средних кобыл при глубоком и введении руки можно прощупать плод, он располагается впереди лонного сращения. При исследовании средних маточных артерий отмечается неодинаковое увеличение их диаметра и вибрация обеих артерий, которая сильнее выражена со стороны беременного рога («жужжит»).
7 и 8 м е с я ц ж е р е б о с т и. При глубоком введении руки прощупываются отдельные части плода, но не всегда. Контуры матки, вследствие ее большого размера обычно не определяются. На восьмом месяце жеребости легко прощупываются части плода. При надавливании ладонью на матку плод опускается вниз, а затем возвращается на прежнее место и при этом ощущается толчок в руку. Средние маточные артерии еще больше увеличены и при сдавливании их между пальцами ощущается вибрация. Отмечается вибрация задней маточной артерии на стороне беременного рога матки.
9 м е с я ц ж е р е б о с т и. Шейка матки смещена к лонным костям; у отдельных кобыл она располагается на краю лонных костей. Плод хорошо прощупывается. Отмечается асимметрия увеличенных средних маточных артерий. Но вибрация их стенок одинаковой силы. На стороне беременного рога хорошо выражена вибрация задней маточной артерии.
10 м е с я ц ж е р е б о с т и. Вследствие больших размеров плода и матки, часть плода и шейки матки внедряются в тазовую полость. Плод хорошо прощупывается. Все маточные артерии увеличены в диаметре, они легко обнаруживаются по очень сильной вибрации их стенок («жужжанию»).
11 м е с я ц ж е р е б о с т и. В полости таза вместе с маткой обнаруживают части плода. Появляются предвестники плода.
Лабораторные методы
Метод влагалищных мазков. Этот метод применим только для определения жеребости кобыл. Перед взятием слизи из влагалища необходимо наружные органы кобылы обмыть теплой водой с мылом. Затем, введя зеркало-расширитель во влагалище, берут слизь из глубины верхнего свода влагалища посредством длинной острой ложечки с предварительно затупленными краями или стерильным ватным тампоном. По получении слизи делают мазок на предметном стекле из слизи. Для производства мазка можно воспользоваться покровным стеклом. Мазок высушивают, фиксируют метиловым спиртом в течение 5 минут, окрашивают по Гимза (2 капли на 1 мл дистиллированной воды) в продолжение 25–30 минут и тщательно просушивают.
При микроскопическом исследовании мазка слизи от жеребой кобылы обнаруживаются клетки мерцательного эпителия, слизевые шары и редко – лейкоциты. У нежеребых кобыл во влагалищной слизи наблюдают нейтрофильные лейкоциты, клетки плоского эпителия и одиночно встречающиеся клетки мерцательного эпителия.
В качестве дополнительных показаний для постановки диагноза на жеребость обращают внимание на клинические признаки, наблюдаемы при макроскопическом исследовании полости влагалища.
Слизистая оболочка влагалища с 3-недельной жеребости животного покрывается густой, очень вязкой и мутной слизью, которая затрудняет введение и выведение влагалищного зеркала. С этого срока жеребости слизистая оболочка влагалища становится анемичной, сухой и без блеска. Отверстие шейки матки плотно закрыто слизью, образующей как бы пробку, вследствие этого влагалищная часть шейки матки выглядит тусклой. К 4–5 неделям жеребости влагалищная часть шейки матки отклоняется обычно вправо или влево.
Гормональный метод. На основании изучения физиологии передней доли гипофиза и яичника разработана реакция на беременность, основанная на очень раннем появлении в крови жеребых кобыл гормона пролана и в моче беременных кобыл, коров и свиней – гормона фолликулина.
Для исследования на пролан у животного берут из яремной вены около 25␓50 мл крови, из нее отстаивают сыворотку, которую инъецируют без всякой обработки под кожу мышам. Инъекция в количестве по 0,1–0,4 мл исследуемой жидкости производится в течение 3 дней по 2 раза в день инфантильным (неполовозрелым) мышам-самкам. Вес такой мыши составляет 6–8 г (3–4 возраст).
Для исследования на фолликулин у животного берут мочу посредством катетера или путем выжидания естественного мочеотделения. Моча перед инъекцией мышам подвергается обработке эфиром для снижения ее токсичности. Для этого моча отстаивается. Образовавшийся сверху прозрачный слой сливается в количестве до 10 мл, подливается уксусная кислота для создания слабокислой реакции и прибавляется эфир в равном объеме. После этого моча встряхивается в течение 5 минут. Затем содержимому пробирки дают отстояться в течение 10 минут; эфир сливают, а мочу оставляют в открытом сосуде на несколько часов для полного удаления остатков эфира. Тогда мочу разбавляют в 3 раза дистиллированной водой и в таком виде впрыскивают под кожу мышам в шесть приемов в течение 3 дней. Для выявления фолликулина моча вводится кастрированным мышам-самкам или инфантильным.
Для уточнения диагноза моча или кровь от каждого исследуемого на беременность животного вводится 3–4 мышам. При наличии в исследуемой жидкости половых гормонов течка у мышей появляется через 72–100 часов после начала инъекции. Для обнаружения течки, начиная с утра 3-го дня, от мышей посредством тампона берут два раза в день выделения из влагалища. Из полученной слизи делают на предметном стекле в капле воды мазок, который рассматривают под микроскопом.
При наличии течки у мышей в мазке обнаруживаются только сплошные массы клеток ороговевшего безъядерного эпителия. В период покоя в мазке обнаруживаются лейкоциты и ядерные эпителиальные клетки.
Реакцию течки можно подтвердить вскрытием подопытных мышей, при котором обнаруживают увеличение и гиперемию матки. При реакции на пролан необходимо для дополнительной проверки вскрыть одну из подопытных мышей и в случае положительного результата находят увеличение яичников, присутствие в них зрелых фолликулов, красных кровяных точек на месте вскрывшихся графовых пузырьков и даже желтых тел. Кроме того, хорошо заметны гипертрофия и гиперемия половых органов.
Минимальное количество гипофизарного или фолликулярного гормона, способное вызвать реакцию течки у самок-мышей, называют мышиной единицей.
У лошадей с 30-го дня жеребости можно попытаться использовать метод, основанный на обнаруживании в крови гормона пролана. Между 3 и 42 днями жеребости этот метод иногда дает неточные результаты, так как в этот период содержание пролана в крови незначительно (350–750 м. е. в литре крови). С 42-го по 100-й день жеребости количество гормона пролана в крови сильно повышается (до 100 000–130 000 м. е.), а потому в этот период реакция наиболее точная – дает верные результаты почти в 10а% случаев. После же 3 месяцев жеребости количество гормона пролана сильно снижается.
С 3 месяцев жеребости и до родов определение жеребости производят на основании обнаруживания в моче жеребой кобылы огромного количества гормона фолликулина, исчисляемое в десятках и даже сотнях тысячах мышиных единиц в литре моче. Правда, гормон фолликулин обнаруживается и нежеребых и в начале жеребости кобыл, но количество его исчисляется только в нескольких тысячах мышиных единиц в литре мочи. Таким образом, по разнице в количестве гормона фолликулина можно судить о жеребости кобылы.
Микроскопия мазков из влагалищной слизи. Слизь берут с шейки матки (лучше с ее устья) стерильным плотным ватным тампоном с помощью корнцанга. Эти тампоном делают ровные мазки на сухом, обезжиренном предметном стекле. Мазки высушивают на воздухе, фиксируют метиловым спиртом в течение 5 минут, окрашивают краской Гимза (на 1 мл дистиллированной воды 2–г капли краски) на протяжении 25–30 минут, тщательно смывают краску, высушивают и микроскопируют.
В мазках из слизи, взятой у жеребых кобыл, находят значительное количество клеток мерцательного эпителия, слизевые шары голубого цвета, единичные клетки плоского эпителия и иногда незначительное количество лейкоцитов.
В мазках из слизи, взятой у нежеребых кобыл, обнаруживают большое количество лейкоцитов и клеток плоского эпителия, единичные клетки мерцательного эпителия. Шаров из слизи нет. Слизь на мазке лежит ровным слоем.
Биологическое исследование крови и мочи. В период беременности в крови и моче кобыл накапливается довольно большое количество гонадотропных (фолликулостимулирующий гормон – ФСГ и лютеинизирующий гормон – ЛГ) и гонадальных (фолликулин) гормонов, стимулирующих функциональную деятельность половых органов.
Диагностика жеребости по результатам биологического исследования крови или мочи основана на выявлении количественного содержания в них названных гормонов. Этот метод диагностики отличается высокой точностью (95–100%), но, несмотря на это, при массовых исследованиях на жеребость он применяется редко из-за сложности и дороговизны его выполнения.
Для выявления гормонов в крови и моче жеребых кобыл существуют следующие способы: 1) Колла и Харта, 2) Фридмана и Шнейдера, 3) Цондека и Ашгейма.
При изучении функционального состояния яичников некоторые авторы заменяют лапаротомию осмотром яичника через фистулу брюшной стенки.
Для этой же цели предложена пересадка яичника в переднюю камеру глаза кастрированных крольчих. При удачной операции, с ослаблением воспалительной реакции, роговица просветляется (в первые дни послеоперационного периода она мутнеет), и за привившимся яичником очень просто и удобно вести наблюдение.
После введения испытуемой сыворотки в ушную вену крольчих в трансплантате можно видеть кровоизлияния, через три дня – увеличение фолликулов, а через пять дней – ясную лютеинизацию.
Реакция Цондека и Ашгейма. Сущность реакции – выявление фолликулина в моче ил крови беременных.
У жеребой кобылы в моче фолликулина в сотни раз больше, чем в крови, поэтому при постановке реакции используют мочу. Содержание фолликулина в моче увеличивается с течением жеребости: в первые три месяца колеблется в пределах 300–800 МЕ, с третьего месяца до выжеребки достигает 28 000–500 000 и даже 1 000 000 МЕ в 1 л мочи.
Эти данные указывают на целесообразность применения фолликулиновой реакции преимущественно после третьего месяца жеребости, а в более ранней стадии – исследование на пролан.
Техника реакции
. Мочу пропускают через бумажный фильтр, подкисляют уксусной кислотой до слабокислой реакции (лакмус). Для освобождения от токсичных веществ к моче прибавляют равное количество эфира и тщательно взбалтывают. Эфир сливают, а мочу оставляют стоять открытой до испарения остатков эфира (пока не останется слабый запах). Обработка эфиром повышает активность фолликулина.
Лабораторными животными служат овариоэктомированные белые мыши (кастраты), выдержанные в течение двух недель после операции и проверенные на отсутствие течки. Можно использовать инфантильных самок мышей; у каждой из них окрасить шерсть на условном месте и в течение трех дней два раза в день вводить под кожу:
к а с т р а т а м
1-й мыши – 0,3 цельной мочи
2-й » – 0,2 » »
3-й » – 0,1 » »
4-й » – 0,1 мочи, разбавленной
водой в 2 раза
инфантильным
1-й мыши – 0,2 цельной мочи
2-й » – 0,1 » »
3-й » – 0,1 » »
4-й » – 0,1 мочи, разбавленной
водой в 2 раза
1-й мыши… 0,5
2-й »… 0,3
3-й »… 0,1
1-й крысе… 1,0
2-й »… 0,5
3-й »… 0,3