На правах рукописи Амосова Евдокия Наумовна Антиметастатическая активность препаратовприродного происхождения14.00.25 – фармакология, клиническая фармакологияАвтореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наукТомск – 2007 Работа выполнена в ГУ Научно-исследовательском институте фармакологии Томского научного центра СО РАМННаучные консультанты:доктор медицинских наук, Гольдберг Евгений Даниловичпрофессор, академик РАМН,заслуженный деятель науки РФдоктор биологических наук, ^ Зуева Елена ПетровнапрофессорОфициальные оппоненты:доктор биологических наук, Плотникова Татьяна Макаровнапрофессордоктор медицинских наук, ^ Пузырев Валерий Павловичпрофессор, академик РАМН, заслуженный деятель науки РФдоктор биологических наук Поветьва Татьяна Николаевна^ Ведущая организация: ГУ НИИ онкологии Томского научного центра СО РАМНЗащита состоится «______» ________________ 2007 г. в _______часов на заседании диссертационного совета Д 001.031.01 при ГУ НИИ фармакологии Томского научного центра СО РАМН (634028, г. Томск, пр. Ленина, 3).С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГУ НИИ фармакологииТомского научного центра СО РАМН.Автореферат разослан «_____» _______________ 2007 г.Учёный секретарь диссертационного совета,доктор медицинских наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ Удут В.В.^ ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫАктуальность проблемы. В настоящее время смертность населения от онкологических заболеваний занимает одно из ведущих мест [Greenlee R.T. et al., 2000; Hill M.J., 2001; Gonzalez-Diego P. et al., 2000]. В России в 2000 г. диагноз «злокачественное новообразование» установлен 448 602 больным, при этом заболеваемость составила 309 человек на 100 тысяч населения [Чиссов В.И. и др., 2002]. Показатели общей онкологической смертности в последние годы мало изменились, за исключением некоторого снижения при раке молочной железы [Хансон К.П. и др., 1996]. В Европе максимальные показатели смертности от рака зарегистрированы в 1988 г., в 1997 г. отмечено их уменьшение на 9,1 %. Считают, что некоторое снижение смертности от рака произошло в связи с профилактическими мерами (рак легкого), внедрением программ скрининга (рак молочной железы) и успехами лечения (лимфомы, гормональнозависимые опухоли) [Толкушин А.Г. и др., 2006; Levi F. et al., 2002]. Для больных местнораспространенными и метастатическими формами рака прогноз за последние годы не улучшился [Хансон К.П. и др., 1996; Cameron M., 2000], а пациенты с этими формами рака составляют значительную группу. Хирургическое удаление опухоли продолжает оставаться основным способом лечения злокачественных новообразований [Тришкин В.А., 1996; Ананьев В.С. и др., 2006]. Успех применения этого метода во многом зависит от своевременности проведения операции, а удаление опухоли на ранних стадиях болезни позволяет добиться стойкого выздоровления у 70-80 % пациентов [Агеенко А.И. и др., 1982]. Однако даже в случае радикально выполненной операции больные часто погибают от метастазов и рецидивов. Распространение опухолевых клеток в организме и их рост - это сложный многоэтапный процесс, который зависит, с одной стороны, от свойств этих клеток и находится под влиянием первичного опухолевого узла, а с другой - от состояния противоопухолевой резистентности организма [Балицкий К.П. и др., 1991; Терещенко И.П., Кашулина А.П., 1995]. Использование традиционных методов лечения (хирургического, лучевого, химиотерапевтического и их комбинаций) часто приводит к снижению резистентности организма, а эффективность этих воздействий во многом определяется развитием метастатического процесса. Среди факторов, способных вызвать ослабление противоопухолевой резистентности организма, в первую очередь следует назвать стрессорные нагрузки. Развитие опухоли некоторые авторы рассматривают как состояние хронического стресса [Шапот В.С., Шелепов В.П., 1983], а хирургическое удаление опухолевого узла, являясь мощным стрессорным фактором, нередко приводит к ещё большему изменению противоопухолевой резистентности, в связи с чем возрастает опасность как рецидивирования опухоли, так и увеличения скорости роста метастазов. Противоопухолевая резистентность организма во многом определяется состоянием нейроэндокринной и иммунной систем. При оценке нейрогуморального статуса у животных с метастазирующими опухолями обнаружены фазные изменения нервных и эндокринных механизмов в динамике роста опухоли: на ранних этапах роста опухоли наблюдается активация гипофизарно-надпочечниковой и симпатоадреналовой систем, что может стимулировать процесс метастазирования опухолевых клеток; в период, предшествующий появлению метастазов, отмечается стабилизация нейрогормональных показателей [Балицкий К.П. и др., 1991]. В поздние сроки, когда опухоль достигает больших размеров и начинает некротизироваться, вызывая интоксикацию организма, бурно развиваются метастазы, наблюдается спад нейрогормональной активности. Существенное влияние на выявленные в динамике роста опухоли нейрогуморальные изменения оказывают хирургическое удаление опухоли и эмоционально-болевой стресс, в ряде случаев эти воздействия могут стимулировать процесс метастазирования [Балицкий К.П., Шмалько Ю.П., 1987]. Важная роль в реализации механизмов противоопухолевой резистентности принадлежит системе иммунитета. Первым барьером на пути распространения опухолевых клеток являются клетки-эффекторы, относящиеся к системе естественной резистентности: естественные клетки-киллеры, макрофаги и нейтрофилы. Они способны распознавать и вызывать отторжение небольшого числа злокачественных клеток, при этом их действие неспецифично. Накоплен большой экспериментальный и клинический материал, свидетельствующий о снижении или изменении активности иммунокомпетентных клеток с развитием опухолевого процесса, после оперативного вмешательства или проведения курса химиотерапии [Зимин Ю.И. и др., 1985; Меерсон Ф.З., Сухих Г.Т., 1985; Билынский Б.Т. 1991; Сорокин А.А., 2003; Погодина О.Н., Булычев А.Г., 2004; Эллиниди В.П. и др., 2005; Carson W.T. et al., 2001; Eremin O. et al., 2001; Paholyuk T.D. et al., 2004]. Повышения эффективности существующих способов лечения можно добиться при включении в схему лечения препаратов, обладающих антиметастатической активностью и повышающих противоопухолевую резистентность, за счет воздействия на иммунную и нейроэндокринную системы организма. В настоящее время в онкологической практике с этой целью наряду с классическими методами лечения (хирургическим, химиотерапевтическим, лучевым) широко используются модификаторы биологических реакций – агенты, оказывающие влияние как на опухолевые клетки, так и на различные регуляторные системы организма [Herberman R.A., 1985; Навашин С.М., Вядро М.М., 1989; Чердынцева Н.В., 2002; Переводчикова Н.И., 2005]. В их число входят природные и синтетические иммуномодуляторы, цитокины и их индукторы, моноклональные антитела, дифференцирующие агенты и др. Одним из источников для пополнения этой группы могут быть препараты природного происхождения, в том числе, из лекарственных растений, содержащие богатый набор биологически активных веществ, обладающие широким спектром фармакологической активности и оказывающие существенное влияние на гомеостаз организма.^ Цель исследования. Целью настоящего исследования явились экспериментальный поиск препаратов природного происхождения, обладающих антиметастатическими свойствами и увеличивающих противоопухолевую резистентность организма, и разработка способов повышения эффективности хирургических методов лечения.^ Задачи исследования: Изучить влияние препаратов природного происхождения на развитие карциномы легких Льюис и определить среди них наиболее эффективно ингибирующие процесс метастазирования. Изучить влияние препаратов природного происхождения на развитие реакции острого стресса. Изучить влияние препаратов природного происхождения на развитие процесса метастазирования в условиях операционного стресса и удаления первичного опухолевого узла. Исследовать влияние наиболее эффективных антиметастатических препаратов природного происхождения на некоторые механизмы повышения противоопухолевой резистентности организма.^ Научная новизна. На основании скрининговых исследований средств природного происхождения выделена группа препаратов, обладающих антиметастатическими свойствами (ИИМ > 50 %), вызывающих достоверное снижение частоты метастазирования, количества метастазов и/или их площади (тималин, препарат подорожника, экстракты бадана тихоокеанского, бархата амурского, винограда черного, водяники черной, дудника даурского, календулы лекарственной, левзеи сафлоровидной, леспедеци двуцветной, лопуха войлочного, маклеи мелкоплодной, облепихи крушиновидной, ореха маньчжурского, родиолы розовой, секуринеги полукустарниковой, солодки голой, чистотела большого, шлемника байкальского). Показана возможность подавления процесса метастазирования при удалении опухолевого узла тималином, эпиталамином, глицирамом, препаратом подорожника и экстрактами бадана тихоокеанского, левзеи сафлоровидной, облепихи крушиновидной, одуванчика лекарственного, осины обыкновенной. У глицирама, экстрактов коры и побегов облепихи крушиновидной и одуванчика лекарственного обнаружено антирецидивное действие. Выявлено, что тималин, эпиталамин, препарат подорожника и экстракты бадана тихоокеанского, бархата амурского, календулы лекарственной, левзеи сафлоровидной, леспедеци двуцветной, облепихи крушиновидной, ореха маньчжурского, осины обыкновенной, чистотела большого, шлемника байкальского обладают антистрессорной активностью. Анальгетическая активность обнаружена у экстрактов бадана тихоокеанского, облепихи крушиновидной и осины обыкновенной. Повышение противоопухолевой резистентности под действием тималина, сока подорожника, облепихи крушиновидной, шлемника байкальского связано с их влиянием на иммунную и нейроэндокринную системы организма.^ Практическая значимость работы. На основании скрининговых исследований выделена группа препаратов природного происхождения, обладающих антиметастатическими свойствами, и отобраны средства, подавляющие процесс метастазирования при удалении опухолевого узла и хирургических вмешательствах. Определена роль иммунной и нейроэндокринной систем организма в механизмах повышения противоопухолевой резистентности под действием тималина, эпиталамина, препарата подорожника, экстракта облепихи крушиновидной. Результаты экспериментального исследования являются основанием для изучения возможности использования препаратов природного происхождения как средств дополнительной терапии у больных со злокачественными новообразованиями при хирургическом способе лечения. Результаты работы явились основой для создания методических указаний по доклиническому изучению средств, обладающих способностью ингибировать процесс метастазирования и повышать эффективность цитостатической терапии злокачественных опухолей [Руководство …, Москва, 2005].^ Апробация работы. Материалы диссертации докладывались и обсуждались на Всесоюзной конференции “Вопросы экспериментальной и клинической онкологии” (Томск, 1982); III Всероссийском съезде онкологов (Ростов-на-Дону, 1986); Всесоюзной конференции “Новые лекарственные препараты из растений Сибири и Дальнего Востока” (Томск, 1986, 1989); Всесоюзном симпозиуме “ Метастазирование злокачественных опухолей. Новые подходы” (Киев, 1987, 1991); Всесоюзной конференции “Актуальные проблемы экспериментальной химиотерапии опухолей” (Черноголовка, 1987); Республиканской конференции по медицинской ботанике (Киев, 1988, 1994); Всесоюзной конференции “Оценка фармакологической активности химических соединений: принципы и подходы” (Москва, 1989); I съезде Российского научного общества фармакологов (Волгоград, 1995); I Всероссийской конференции по ботаническому ресурсоведению (Санкт-Петербург, 1996); I съезде онкологов стран СНГ (Москва, 1996); 3 съезде физиологов Сибири и Дальнего Востока (Новосибирск, 1997); Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство», (Москва, 1992, 1995, 1996, 1997, 1998, 2000, 2001); Международном симпозиуме “China-Russia International Conference on Pharmacology” (Harbin, China, 2005); VI Всероссийской научно-практической конференции с международным участием “Отечественные противоопухолевые препараты” (Москва, 2007).Публикации. По теме диссертации опубликовано 87 работ, из них 26 в журналах, рекомендованных “Перечнем …” ВАК Минобрнауки России и 1 – за рубежом.^ Объём и структура работы. Диссертация изложена на 380 страницах машинописного текста и состоит из введения, 4 глав, выводов и списка использованной литературы. Работа иллюстрирована 167 таблицами и 34 рисунками, библиографический указатель включает 424 источников, из них 283 отечественных и 142 иностранных.^ МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯЭксперименты выполнены на линейных и беспородных мышах и крысах обоего пола (линии и количество указаны в таблице 1). Животных 1 категории получали из питомников: «Столбовая» (г. Москва), «Рассвет» (г. Томск), лаборатории экспериментального биомоделирования ГУ НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН (г. Томск, сертификат имеется) и содержали в соответствии с правилами, принятыми Европейской Конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей (Страсбург, 1986). Распределение животных по сериям экспериментов в зависимости от цели исследования приведено в таблице 1. Таблица 1Распределение животных по сериям экспериментов Цель исследования Вид и линия животных Количество животных Оценка влияния препаратов природного происхождения на метастазирование карциномы легких Льюис Мыши: С57Вl/6, F1(СВА х С57Вl/6), F1(DВА/2 х С57Вl/6) 1370 Оценка влияния препаратов природного происхождения на развитие реакции острого стресса Мыши: беспородные, Balb/с, С57Вl/6 816 Оценка влияния препаратов природного происхождения на метастазирование карциномы легких Льюис в условиях удаления опухолевого узла Мыши: С57Вl/6, F1(СВА х С57Вl/6), F1(DВА/2 х С57Вl/6) 1120 Оценка влияния препаратов природного происхождения на метастазирование лимфосаркомы Плисса в условиях операционного стресса Крысы: беспородные и линии Wistar 227 Оценка влияния препаратов природного происхождения на болевую чувствительность мышей Мыши: беспородные, СВА, Balb/с, F1(СВА х С57Вl/6) 387 Примечание. Исследование механизма действия препаратов природного происхождения на противоопухолевую резистентность организма проводили в экспериментах на животных, у которых оценивали влияние изучаемых средств на метастазирование.На этапе скрининговых исследований оценивали действие изучаемых средств как на развитие опухолевого узла и выраженность процесса метастазирования карциномы легких Льюис у мышей, так и на эффективность цитостатического лечения. При проведении химиотерапии использовали циклофосфан, который вводили внутримышечно на 10-14 сутки после трансплантации опухолевых клеток в режиме, вызывающем умеренное торможение опухолевого процесса и выраженную лейкопению (125 мг/кг; 100 мг/кг х 2, с интервалом между введениями 96 ч).^ Характеристика опухолевых штаммов Карцинома легких Льюис (3LL) Опухоль возникла спонтанно как карцинома легких мышей линии C57Bl/6 в 1951 г. [Софьина З.П. и др., 1980; Mayo J.G., 1972; Hellman K., 1984]. Перевивается на 12-14 сут роста, средняя продолжительность жизни животных – 24 дня. Метастазирует гематогенно в легкие практически в 100 % случаев [Софьина З.П. и др., 1980; Софьина З.П., 1987]. Адекватный экспериментальный поиск антиметастатических средств стал возможен лишь после введения в практику этого опухолевого штамма [Софьина З.П., 1976; Hellman K., 1984].^ Лимфосаркома Плисса (LS-Плисса) Опухоль индуцирована у крысы-самки введением 3,3-дихлорбензидина в 1958 г. Г.Б. Плиссом. Перевивается подкожно 20 % взвесью опухолевых клеток на 14–16 сут после перевивки, метастазирует по лимфогенному типу. Продолжительность жизни животных – 12-95 дней. Опухоль состоит из лимфоидных клеток разного размера неправильной формы [Ларионов Л.Ф., 1962].^ Способы моделирования операционного стрессаУдаление первичного опухолевого узла. Карциному легких Льюис перевивали двумя способами: в подушечку задней лапы (2 х 105 клеток в 0,1 мл физиологического раствора) или под кожу спины с правой стороны (2-7 х 106 клеток в 0,1 мл физиологического раствора). Опухоль удаляли под эфирным наркозом в разные сроки (в зависимости от темпов роста опухолевого узла). Наркоз давали ингаляционно до исчезновения болевой чувствительности. При перевивке в подушечку удаляли лапку с опухолью до коленного сустава при наложении перетягивающего жгута, операционную рану обрабатывали медицинским клеем. Опухоль, перевитую под кожу спины, удаляли вместе с кожным лоскутом, края раны сшивали.^ Операция «пробная лапаротомия». Крыс с лимфосаркомой Плисса, перевитой подкожно (20 % взвесь клеток в 0,2 мл физиологического раствора), оперировали под эфирным наркозом на 7 сут после трансплантации опухолевых клеток. Переднюю брюшную стенку послойно разрезали, для усиления стрессорного воздействия хирургической травмы пинцетом раздражали корень брыжейки, на операционную рану послойно накладывали швы.^ Основные критерии оценки эффективности леченияПротивоопухолевая активность Процент торможения роста опухоли (ТРО) по массе вычисляли по формуле: средняя масса опухоли – средняя масса опухоли ТРО = в контрольной группе в опытной группе х 100 % средняя масса опухоли в контрольной группе^ Антиметастатическая активность Частоту метастазирования опухоли вычисляли как количество животных с метастазами по отношению к общему количеству животных в группе (в процентах). При метастазировании опухоли в легкие подсчитывали количество метастазов и определяли их диаметр (для каждого животного и среднее значение по группам). Площадь метастатического поражения определяли по формуле S = πr.2 Индекс ингибирования метастазирования (ИИМ) позволял определить тяжесть метастатического поражения, так как при его расчете использовались такие показатели, как частота метастазирования и количество метастатических узлов в легких: ИИМ = х 100%, где Ак и А – частота метастазирования в лёгкие у мышей контрольной и опытной групп; Вк и В – среднее число метастазов в лёгких в контрольной и опытной группах [Архипов С.А. и др., 1982]. В случае значительного поражения легочной ткани, когда регистрировалось большое количество метастатических узлов, оценивали степень метастатического поражения по шкале, предложенной D. Tarin и J.E. Price (1979), и позволяющей дифференцировать тяжесть поражения в зависимости от количества метастазов и их размеров. Выделяли низкую (LCP – low colonisation potential: 1 степень – 30 узлов, отсутствуют сливные узлы; 4 – 100 узлов) степень поражения легких. При массивном поражении легочной ткани рассчитывали массу метастазов, вычитая из средней массы легких в опытной группе среднюю массу легких интактных животных, торможение метастазирования (ТМ) вычисляли в процентах к контролю. В случае лимфогенного метастазирования в лифатические узлы определяли их массу и среднее значение этого показателя в группе.Влияние препаратов на развитие острой стрессорной реакции проводили по методу Ю.И. Добрякова (1978). Анальгетическое действие оценивали на модели «корчей», вызванных внутрибрюшинным введением мышам 1-3 % уксусной кислоты (0,1 мл/10 г массы тела) [Руководство ..., 2005]. ^ Оценка противоопухолевой резистентности организмаОценку функциональной активности клеток лимфоузлов проводили с помощью теста нейтрализации опухолевых клеток, предложенного H.J. Winn (1961). Для тестирования мембранотоксического действия естественных клеток-киллеров использовали метод, предложенный Hamaoka (1980) и модифицированный М.Н. Рыковой (1981). Содержание 11-оксикортикостероидов (11-ОКС) определяли с помощью флюориметрического метода Ю.А. Панкова и И.Я. Усватова [Колб В.Г., Камышников В.С., 1976]. Уровень кортизола определяли с помощью радиоиммунного набора «Sea Sorin» (Франция), а подсчет радиоактивности проводили на гамма-спектрометре «Tracor analytic» (США).^ Препараты, использованные в работеПри проведении исследований использовали экстракты, изготовленные методом перколяции [Агигихин И.С., 1977; Технология лек. форм, 1991] на этиловом спирте (бадана тихоокеанского, бархата амурского, дудника даурского, календулы лекарственной, леспедеци двуцветной, ломоноса цельнолистного, лопуха войлочного, маклеи мелкоплодной, ореха маньчжурского, секуринеги полукустарниковой, чистотела большого) в лаборатории лекарственных растений Горнотаёжной станции ДВО РАН, в ГОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» и Сибирском ботаническом саду при ГОУ «Томский государственный университет», а также созданные по оригинальным технологиям (винограда черного, водяники черной, облепихи крушиновидной, одуванчика лекарственного, осины обыкновенной, солодки уральской, чистотела большого, шлемника байкальского) и официнальные препараты из растений: сок подорожника, экстракты левзеи сафлоровидной, элеутерококка колючего и глицирам, изготовленный из солодки голой. Технологии получения препаратов из облепихи крушиновидной и осины обыкновенной разработаны на кафедре технологии лекарственных форм ГОУ ВПО “Алтайский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (г. Барнаул), при их приготовлении использовали способ противоточного многоступенчатого экстрагирования (реперколяция) с применением в качестве экстрагента 40 % этанола, сгущение и высушивание проводили в вакуумно-сушильном шкафу. Экстракты одуванчика лекарственного, солодки уральской, шлемника байкальского приготовлены в лаборатории химии и технологии фенольных препаратов Государственного научного центра лекарственных средств (г. Харьков). Экстракт из побегов водяники черной получен по оригинальной технологии, разработанной в ГОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию». Экстракты виноградных косточек и ольхи клейкой получены на кафедре факмакотерапии и фармакокинетики Украинской фармацевтической академии (г. Харьков). Экстракты календулы лекарственной, маклеи мелкоплодной, чистотела большого получены из Всесоюзного института лекарственных растений. Иммуномодуляторы полипептидной природы - тималин и эпиталамин были получены из Военно-медицинской академии (г. Ленинград).^ Статистическая обработка результатов Экспериментальные данные, представляющие собой количественные показатели, представлены в виде Х ± m, где Х – среднее значение, m – стандартная ошибка среднего. При сравнении выборок использовали непараметрический критерий Вилкоксона-Манна-Уитни (U). Метод углового преобразования Фишера () применяли для выявления различий качественных показателей [Гублер Е.В., 1978]. Различия считали достоверными при Р ≤ 0,05. Для определения корреляционных связей между параметрами вычисляли коэффициент корреляции R Спирмана, который считали достоверным при Р Автор выражает большую благодарность всем, предоставившим препараты и экстракты для проведения исследований, и Зуевой Е.П., Разиной Т.Г., Крыловой С.Г., Стахеевой М.Н. за помощь в исследовании фармакологической активности препаратов.^ РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕОтбор препаратов, обладающих антиметастатической активностью и повышающих противоопухолевую резистентность организма, требовал создания особой системы скрининга, которая была разработана коллективом авторов, в том числе, и сотрудниками лаборатории онкофармакологии ГУ НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН. На её основе составлены «Методические рекомендации по доклиническому изучению средств, обладающих способностью ингибировать процесс метастазирования и повышать эффективность цитостатической терапии злокачественных опухолей», которые включены в «Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических средств» (2005). При проведении скрининга использовали спонтанно метастазирующую карциному легких Льюис (3LL). Считают, что адекватный экспериментальный поиск антиметастатиков стал возможен лишь после введения в практику этой опухоли, которая метастазирует, преимущественно, по гематогенному пути в легкие и образует видимые узлы [Софьина З.П., 1976; Hellman K., 1984]. По данным Е.М. Трещалиной и соавт. (1990), этот опухолевый штамм обладает высокой чувствительностью к природным веществам и позволяет отбирать до 100 % средств с противоопухолевой активностью. На этапе скрининга одновременно оценивали действие исследуемых препаратов как на развитие опухолевого процесса, так и на эффективность цитостатической терапии. При проведении химиотерапии применяли циклофосфан. Такой подход позволял уже на этапе первичного отбора выявлять средства, обладающие противоопухолевым действием, антиметастатической активностью, повышающие эффективность цитостатической терапии. В некоторых случаях экстракты, не оказывая влияния на рост опухоли и её метастазов, существенно увеличивали антиметастатическую или противоопухолевую активность цитостатика, что также представляло интерес и свидетельствовало о повышении противоопухолевой резистентности организма под влиянием испытуемого средства. Проведенные эксперименты показали, что из 34 исследованных препаратов природного происхождения антиметастатической активностью обладают тималин и 18 растительных экстрактов (56 %): бадан тихоокеанский, бархат амурский, виноград черный, водяника черная, дудник даурский, календула лекарственная, левзея сафлоровидная, леспедеца двуцветная, лопух войлочный, маклея мелкоплодная, облепиха крушиновидная, орех маньчжурский, подорожник большой, родиола розовая, секуринега полукустарниковая, солодка голая, чистотел большой, шлемник байкальский (табл. 2). При их введении животным с опухолью наблюдалось снижение частоты метастазирования и количества метастатических узлов в легких либо одного из названных показателей. Причем у 13 из перечисленных выше экстрактов, что составляет 41 % от общего числа исследованных, индекс ингибирования метастазирования превышал 50 % (табл. 2).Таблица 2Влияние экстрактов из растений на развитие опухолевого процесса и эффективность лечения мышей с карциномой легких Льюис циклофосфаном Название растения Использование в народной медицине для лечения опухолей Действие на опухоль Действие на метастазирование Увеличение эффективности химио- терапии Химический состав 1 2 3 4 5 6 1. Аир болотный (Acorus calamus) + – – Эфирное масло, горечи, гликозиды, дубильные в-ва, витамин С 2. Бадан тихоокеанский (Bergenia pacifica) + ++ + Дубильные в-ва, изокумарины, углеводы, фенолкарбоновые к-ты 3. Бархат амурский (Phellodendron amurense) + – + – Флавоноиды, органические к-ты, алкалоиды, кумарины, дубильные в-ва, витамины С и Р 4. Виноград черный (Vitis vinifera) – + – Дубильные в-ва, флобафены, лецитин, ванилин 5. Водяника черная (Empetrum nigrum) – + – Углеводы, эфирное масло, тритерпеноиды, сапонины, кумарины, дубильные в-ва, флавоноиды, витамин С, фенолкарбоновые к-ты 6. Дудник даурский (Angelica davurica) + – ++ нет данных Кумарины, эфирное масло 7. Календула лекарственная (Calendula officinalis) + + ++ нет данных Каротиноиды, флавоноиды, тритерпеновые гликозиды, слизистые, дубильные и горькие в-ва, аскорбиновая и органические к-ты, смолы, сапонины 8. Княжик сибирский (Atragene sibirica) + + – – Флавоноиды, сапонины, алкалоиды, витамин С 9. Копеечник ферганский (Hedysarum ferganense) – – нет данных Дубильные в-ва, флавоноиды, углеводы, витамин С, каротин 10. Левзея сафлоровидная (Rhaponticum carthamoides) + ++ + Смолистые и дубильные в-ва, алкалоиды, экдистероиды , эфирное масло, каротин, аскорбиновая к-та, лигнаны 11. Леспедеца двуцветная (Lespedeza bicolor) – ++ – Флавоноиды, аскорбиновая и фенолкарбоновые к-ты, алкалоиды 12. Лихнес хальцедонский (Lychnis chalcedonica) – – нет данных Экдистероиды, сапонины, углеводы, флавоноиды, алкалоиды, кумарины 13. Ломонос цельнолистный (Clematis integrif) + – – + Алкалоиды, дубильные в-ва, смолы. карденолиды, сапонины 14. Лопух войлочный (Arctium lappa) + – ++ нет данных Оксикоричные к-ты, инулин, крахмал, эфирное масло 15. Маклея мелкоплодная (Macleaya microcarpa) – + нет данных Алкалоиды: сангвинарин, хелеритрин, протопин, аллокриптомин Продолжение таблицы 2 1 2 3 4 5 6 16. Манжетка обыкновенная (Alchemilla xanthochlora) + + – + Аскорбиновая к-та, дубильные в-ва, горечи, флавоноиды, фосфор, кумарины 17. Облепиха крушиновидная (Hippophae rhamnoides) + ++ + Алкалоиды, тритерпеноиды, серотонин, дубильные в-ва 18. Одуванчик лекарственный (Taraxacum officinale) – – + Тритерпеноиды, горькие гликозиды, инулин, смолы, сахара 19. Ольха клейкая (Alnus glutinosa) + – – + Дубильные в-ва, эфирные масла, смолы, полисахадиды 20. Орех маньчжурский (Iuglans mandshurica) + ++ + Флавоноиды, эфирное масло, дубильные в-ва, алкалоиды 21. Осина обыкновенная (Populus tremula) – – + Дубильные в-ва, гликозиды, эфирное масло, флавоноиды 22. Подорожник большой (Plantago major) + + + + Флавоноиды, сапонины, аукубин, горькие, слизистые и дубильные в-ва, фитонциды, витамины К и С 23. Родиола розовая (Rhodiola rosea) + ++ + Флавоноиды, гликозиды, фенолы, стерины, органические кислоты, эфирные масла, дубильные в-ва 24. Секуринега полукустарниковая (Securinega saffruticosa) – ++ нет данных Алкалоиды, флавоноиды, дубильные в-ва, органические к-ты, смолы 25. Смолевка зеленоцветковая (Silene viridiflora) – – + Экдистероиды, тритерпеновые гликозиды, флавоноиды, алкалоиды, кумарины 26. Смолевка Фривальдского (Silene frivaldszkyana) – – – Экдистероиды, тритерпеновые гликозиды, флавоноиды, алкалоиды, кумарины 27. Солодка уральская (Glycyrrhiza uralensis) + – ++ + Тритерпеновые сапонины, флавоноиды, сахара, пектины, смолистые и горькие в-ва 28. Тимьян Маршалиевского (Thymus marchallianus) + + – – Фенолкарбоновые к-ты, флавоноиды, антоцианы, эфирное масло 29. Тысячелистник азиатский (Achillea asiatica) – – + Алкалоиды, эфирное масло, дубильные в-ва, органические к-ты, смолы, инулин, витамины С и К, флавоноиды 30. Чистотел большой (Chelidonium majus) + + ++ + Алкалоиды, флавоноиды, сапонины, эфирное масло, органические и аскорбиновая к-ты, витамин А 31. Чистец болотный (Stachys palustris) + – стимуляция; - – Флавоноиды, кумарины, следы алкалоидов, витамин С, каратиноиды 32. Шлемник байкальский (Scutellaria baicalensis) + ++ ++ Флавоноиды, дубильные в-ва, смолы, пирокатехины, крахмал Примечание: «+» – достоверное торможение развития опухолевого процесса или индекс ингибирования метастазирования «+» 50 %; «++» – > 50 %. Торможение роста опухоли вызывали 13 экстрактов: аира болотного, бадана тихоокеанского, календулы лекарственной, княжика сибирского, левзеи сафлоровидной, манжетки обыкновенной, облепихи крушиновидной, ореха маньчжурского, подорожника большого, родиолы розовой, тимьяна Маршалиевского, чистотела большого, шлемника байкальского, при этом 4 из них, не обладали антиметастатическим действием (аира болотного, княжика сибирского, манжетки обыкновенной, тимьяна Маршалиевского). Следует отметить, что среди препаратов, обладающих антиметастатической активностью, встречались не оказывающие влияния на развитие первичного опухолевого узла. К этой группе относились экстракты из бархата амурского, винограда черного, водяники черной, дудника даурского, леспедеци двуцветной, лопуха войлочного, маклеи мелкоплодной, секуринеги полукустарниковой, солодки голой. Эффективность химиотерапии повышали следующие экстракты: бадана тихоокеанского, левзеи сафлоровидной, ломоноса маньчжурского, манжетки обыкновенной, облепихи крушиновидной, одуванчика лекарственного, ольхи клейкой, ореха маньчжурского, осины обыкновенной, подорожника большого, родиолы розовой, смолевки зеленоцветковой, солодки голой, тысячелистника азиатского, чистотела большого, шлемника байкальского (табл. 2). Большой интерес представляют препараты, при применении которых наблюдается как подавление роста опухоли и её метастазов, так и повышение антибластомной активности циклофосфана. В эту группу вошли экстракты из 8 растений (25 %): бадана тихоокеанского, левзеи сафлоровидной, облепихи крушиновидной, ореха маньчжурского, подорожника большого, родиолы розовой, чистотела большого, шлемника байкальского. У экстрактов из копеечника ферганского, лихнеса хальцедонского, смолевки Фривальдского не обнаружено влияния на развитие опухолевого процесса и эффективность химиотерапевтического лечения. При использовании чистеца болотного отмечена стимуляция метастатического процесса. Анализ данных о химическом составе исследуемых растений показал, что невозможно связать наличие у них антибластомной, антиметастатической активности или свойств увеличивать эффективность цитостатической терапии с какой-либо одной группой биологически активных веществ, так как растения со сходным химическим составом обнаруживают различную фармакологическую активность. Наряду с этим обращает на себя внимание тот факт, что в состав большинства видов, представляющих интерес для дальнейшего исследования, входят алкалоиды, флавоноиды, дубильные вещества, кумарины (табл. 2). Алкалоиды обладают широким спектром фармакологического действия на организм. Они оказывают транквилизирующее, стимулирующее действие на центральную нервную систему, влияют на артериальное давление (гипертензивное или гипотензивное действие), сердечно-сосудистую систему (суживают или расширяют сосуды), медиаторные системы, функциональную деятельность мышечной системы [Соколов С.Я., Замотаев И.П., 1988; Соколов С.Я., 2000]. Одним из первых препаратов растительного происхождени