КОЛЕСНИК Марина АркадьевнаВлияние табакокурения в молодом возрасте на показатели секреторного иммунитета слюны и их коррекция ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ СОЧЕТАННЫХ ФИЗИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ03.00.13 – физиологияАвторефератдиссертации на соискание ученой степенидоктора медицинских наукКурган – 2009Работа выполнена на базе Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Челябинской государственной медицинской академии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» и медицинского центра профилактики и оздоровления студентов, преподавателей и сотрудников ГОУ ВПО «Челябинский Государственный педагогический университет». ^ Научный консультант: Заслуженный деятель науки РФ доктор медицинских наук, профессор ТЕПЛОВА Светлана НиколаевнаОфициальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессорСашенков Сергей Львович доктор медицинских наук, профессор^ БЫКОВ Евгений Витальеви Оценка лабораторных показателей мукозального иммунитета в слюне. При определении иммунологических исследований использовалась слюна. Взятие материала для исследования проводилось в одно и то же время суток, в 9 часов утра. В слюне определяли: содержание белка, муцина, количество TNF-α, IL-8, lgG, SlgA, уровень общей активности комплемента и активность его компонентов С1 – С5, содержание конечных стабильных метаболитов оксида азота, ЛФ.^ Определение содержания белка и муцина в слюне. Содержание белка и муцина определяли методом Э.Н. Коробейниковой (2002).Определение количества lgG, SlgA, TNF-α, IL-8, ЛФ. Количество lgG, SlgA, TNF-α, лактоферрина (ЛФ) определяли иммуноферментным твердофазным методом с тест – системами НПО «Бест» (Новосибирск), а количество IL-8 с тест-системой производства ООО «Цитокин» (Санкт-Петербург). Учет результатов производили на планшетном фотометре «Multiscan plus» (Labsystems) при длине волны 450 нм.^ Определение общей активности комплемента. Уровень общей активности комплемента в слюне определяли методом титрования по 50% гемолизу (Резникова Л.С., 1967 в модификации Кэбот Е. и Мейер М., 1968). ^ Определение активности компонентов комплемента С1 - С5. Уровень активности компонентов комплемента в слюне определяли методом молекулярного титрования (Красильников А.П., 1984; Shinobu A., Tanaka S. et. al., 1986) путем добавления к слюне и гемолитической системе соответствующего реагента. ^ Определение уровня оксида азота в слюне оценивали по концентрации конечных стабильных метаболитов оксида азота с помощью модификации реакции Грисса (Коробейникова Э.Н., 2002; Scuiz K. et al., 1999). Определение стресс-гормона кортизола в слюне. Определяли набором реагентов «Кортизол-ИФА-Бест» методом иммуноферментного анализа (ИФА). Результаты анализа учитывались спектрофотометрически, при длине волны 450 нм в нМоль/л, диапазон измеряемых концентраций 0 – 1500 нМоль/л. ^ Сочетанные физические факторы – методика профилактических мероприятий пациентов в период изменения курительного поведения. Для изучения эффективности воздействия сочетанных физических факторов с различной степенью никотиновой зависимости, курительного поведения молодых лиц, для оценки эффекта этих факторов на мукозальный иммунитет использовали установку – «Альфамассаж-33», производства фирмы Sybaritic (США) с подобранной нами программой, которая включала: (1) массажные вибрации средней интенсивности (50Гц) на область спины, поясницы, конечностей, (2) термовоздействие (суховоздушная баня) со средним подогревом – 650С, (3) ароматерапию (масло ели, сосны, эвкалипта). Лечение включало 6 процедур ежедневно продолжительностью 30 минут. Пациенты отмечали хорошую переносимость процедур с отсутствием каких-либо побочных эффектов. Комбинированное воздействие электросонфореза (ЭСФ) с 5% раствором мексидола (2 мл) проводили от аппарата «Электросон-10-5» (сила тока – до ощущения покалывания и легкой вибрации, частота – 10Гц, длительность импульсов – 0,5мс, импульсного тока – 10МА). Электросонтерапию и электросонфорез с мексидолом проводили ежедневно, время воздействия – 20-30 минут. Курс лечения 6 процедур. Электросонфорез с 5% мексидолом проводили используя лобно-затылочное воздействие. ^ Методы статистической обработки Статистический анализ материала проводился с использованием статистического пакета – SPSS (V.12). Применялись параметрические непараметрические критерии по Manna-Whitney и Wilcoxon. Методы описательной статистики включали вычисления в виде универсальной медианы (Ме) и ее верхнего и нижнего квартилей (Q25%- нижний квартиль, Q75% – верхний квартиль). При нормальном распределении показателей определяли среднюю арифметическую (М), ошибку средней (m), достоверность различий с помощью критерия Стюдента (t). Различия рассматривали как статистически значимые при p Для определения корреляционной зависимости между показателями применялся коэффициент ранговой корреляции Спирмена (r).Результаты исследования^ Оценка курительного статуса курящих молодых лиц В настоящее исследование включено 180 студентов Челябинского государственного педагогического университета, проходивших курс планового оздоровления в условиях медицинского центра профилактики и оздоровления в 2003–2008 годах. Приоритетной задачей была работа по внедрению здорового образа жизни и борьба с табакокурением. Группа курящих – 150 человек, группа некурящих составила 30 человек. Возраст обследуемых колебался в пределах 18-22 года, средний возраст был равен 20,7±0,47 лет; женщин было 110, мужчин – 40. Распределение по полу и возрасту среди курящих и некурящих было однотипным, достоверных различий между группами в этом отношении не выявлено. В обеих группах преобладали женщины, группы были абсолютно сопоставимы по среднему возрасту (20,67±0,40 и 20,68±0,55 соответственно). Данные анализа интенсивности, длительности курения и уровня никотиновой зависимости у обследуемых студентов приведены в таблице 2 и рисунке 2. Анализ анкет курящих студентов показал, что у 150 обследуемых ИК составил менее 120 (при числе выкуриваемых сигарет в день 9,4±1,2), средний стаж курения был равен 5,42±1,36. Согласно тесту Фагерстрома, слабая НЗ наблюдалась у 15,3% курильщиков (мужчин - 12,5%, женщин – 16,4%), умеренная степень зависимости у 34,6% (мужчин – 37,5%, женщин – 33,6%), высокая НЗ у 37,4% (мужчин – 35%, женщин – 38,2%). Отсутствие НЗ наблюдалось у 12,7% курильщиков (мужчин – 15%, женщин – 11,8%). Таблица 2. Оценка курительного статуса обследуемых студентов Показатель M±m ИК Число выкуриваемых сигарет в сутки 9,4±1,2 Стаж курения 5,42±1,36 Средний показатель никотиновой зависимости в баллах 4,92±0,10 Средний показатель слабой никотиновой зависимости в баллах 3,5±0,13 Средний показатель умеренной никотиновой зависимости в баллах 4,82±0,12 Средний показатель высокой никотиновой зависимости в баллах 7,35±0,06 Для детального изучения степени никотиновой зависимости проведен анализ анкеты Фагерстрома, данные приведены на рисунке 2.^ Рисунок 2. Распределение курящих студентов по степени никотиновой зависимости. Опрос студентов показал, что 36% в качестве основной причины развития у них привычки курения указывали «пример окружающих», 30% считали, что курение помогает снять стресс, 22% полагали, что курение вызывает «положительные» эмоции окружающих, 12% курят для «создание имиджа». Согласно данных теста D. Horn (1976), в большинстве случаев у всех обследованных курящих (n=150) тип курительного поведения носил смешанный характер, преобладающим типом курительного поведения у обследуемых студентов был тип «расслабление», частота которого составляет 39,3% (мужчин – 35%, женщин – 41%). Пациенты курят только в комфортных условиях, с помощью курения получают «дополнительное «удовольствие» к отдыху. Бросают курить долго, много раз возвращаясь к курению (рис. 3). Рисунок 3. Тип курительного поведения обследуемых студентов по тесту Д.Хорна. Следующими по частоте типами курительного поведения у обследуемых курящих студентов были типы: «жажда» - 23,0% (мужчин – 30%, женщин – 20,9%) и «стимуляция» - 18,0% (мужчин – 15%, женщин – 17,2%), при которых пациент закуривает когда снижается концентрация никотина в крови. В конечном счете, курильщики с данным типом курительного поведения нуждаются в увеличивающихся уровнях никотина, чтобы чувствовать себя «нормально». Тип курительного поведения «поддержка» установлен у 12% обследуемых (мужчин – 20%, женщин – 9,1%), он связан ситуационно с волнением, эмоциональным напряжением, психологическим дискомфортом. Тип курительного поведения «игра с сигаретой» наблюдался у 11,8% женщин. Для этого типа характерен низкий индекс курильщика, слабая НЗ или отсутствие ее, курение происходит только в ситуациях общения «за компанию». Тип курительного поведения «рефлекс», который характеризуется тем, что курят автоматически и много (35 и более сигарет в день), не осознавая причин своего курения, в группе обследованных не наблюдался. При слабой НЗ (3,5±0,13) у пациентов достоверно преобладал тип курительного поведения типа «расслабление» - 18,7%, «игра с сигаретой» - 8,6%. При умеренной НЗ (4,76±0,12 баллов) существенно чаще выявлялся тип курительного поведения «расслабление» - 21% случаев и «поддержка» - 12%, при высокой НЗ «стимуляция» - 18,0%, «жажда» - 23,0%. При проведении настоящего исследования со всеми курящими студентами проводились индивидуальные психотерапевтические беседы о необходимости бросить курить. В процессе психотерапевтических бесед поддерживали решение пациентов снизить интенсивность курения вплоть до отказа от курения, подчеркивая, что это решение очень важно для сохранения здоровья. Согласно проведенного анкетирования, 62% студентов в той или иной степени имели мотивацию к отказу от табакокурения, 38% не желали отказаться от привычки курения, поскольку уже пытались это сделать несколько раз. Процесс отказа от курения сложный и порой волнообразный процесс, с возможными рецидивами и срывами. В связи с этим в рамках прохождения курса лечения в медицинском центре пациенту предлагалась не только психологическая поддержка, но и применение сочетанных физических факторов (ФФ). Учитывая, что часто потребность в курении возникает у курильщиков в состоянии тревоги, у всех лиц, включенных в исследование, проводили оценку состояния тревоги по госпитальной шкале Гамильтона (HARS). Результаты представлены на рисунке 4. Примечание: * р ** - р Рисунок 4.Оценка состояния тревоги по шкале Гамильтона (HARS) и показатели тревоги при наличии никотиновой зависимости у студентов. По данным, представленным на рисунке 4 видно, что отсутствие симптомов тревоги среди курящих отмечено достоверно реже (28%), по сравнению с некурящими (66,7%). Субклиническая тревога установлена с равной частотой в обеих группах (34% и 33,3%), но средний балл выраженности тревоги был у курящих достоверно выше, чем у некурящих. Клинически выраженная тревога выявлена только у курящих пациентов (в 38%) и не зарегистрирована ни у одного из некурящих студентов. Клинически чувство тревоги проявлялось в виде внутреннего напряжения, повышения эмоционального фона, в форме психологического дискомфорта. В целом, как показали представленные данные тревожный синдром достоверно чаще выявляется у курящих, а его выраженные степени регистрируются только у курящих студентов. В целом анализ клинических симптомов тревоги позволяет заключить, что у курящих студентов с высокой НЗ достоверно чаще выявляется клинически выраженная тревога (53,7%) по сравнению с субклинической тревогой (19,6%) и отсутствием тревоги (26,7%). У курящих со слабой НЗ достоверно чаще выявляется субклиническая тревога (61,9%) по сравнению с клинически выраженной тревогой (11,9%) и отсутствием симптомов тревоги (26,2%). Следовательно это косвенно подтверждает связь табакокурения с развитием стрессовых реакций. Для точной верификации объективных признаков стрессовых реакций у студентов далее было определено содержание одного из стрессовых гормонов (кортизола) в слюне. Полученные результаты представлены в таблице 3 в виде универсальной средней медианы (Ме) нижних (Q25%) верхних квартилей (Q75%). Уровень кортизола в слюне у курильщиков в сопоставлении с некурящими студентами повышен более чем в 2 раза. Таблица 3. Уровень кортизола в слюне обследуемых студентов Показатель Группа курящих (n=60) Группа некурящих (n=30) Р Me (Q25%-Q75%) Me (Q25%-Q75%) Кортизол нг/мл 170(131-194) 64(40-90) Нами был определен уровень кортизола в слюне у курящих студентов с клинически выраженной тревогой в сопоставлении с некурящими студентами, у которых выраженной степени тревоги не было зарегистрировано ни у одного пациента, эти данные приведены в табл.4. Таблица 4. Уровень кортизола при клинически выраженной тревоге Показатель Группа курящих с клинически выраженной тревогой (n=57) Группа некурящих (n=30) P Me (Q25%-Q75%) Me (Q25%-Q75%) Кортизол нг/мл 83 (78-89) 64 (40-90) Как следует из таблицы 4 уровень кортизола у курящих студентов с клинически выраженной тревогой кортизол в 1,3 раза выше в сравнении с группой некурящих (р Далее был проведен корреляционный анализ взаимосвязи уровня кортизола в слюне и показателей выраженности тревоги в баллах у курящих студентов, а также показателей, отражающих степень НЗ индивидуума. Установлено, что количественные показатели кортизола в слюне достоверно и положительно коррелировали с клинически выраженной тревогой (r=0,699), а также особенно с высокой НЗ (r= 0,829), что отражает сильную корреляционную взаимозависимость. На основе полученных данных невозможно выявить, какой из процессов первичен, однако ясно, что патогенез формирования высокой степени НЗ, несомненно, связан с гормональными особенностями развития генерализованного адаптационного синдрома и с состоянием высокого уровня тревоги. Исследование функции внешнего дыхания в данной работе нами проведено в соответствии с рекомендациями Европейского респираторного общества. Оценка спирометрических показателей выполнена по отношению к должным величинам в процентах.FVC % - форсированная жизненная ёмкость легких;FEV1 % - объем форсированного выдоха за 1 секунду;FEV1/FVC – индекс Тиффно;MEF75,MEF50, MEF25 – средний экспираторный поток, уровень потока на (75%, 50%, 25%) остаточного выдоха. При определении функции внешнего дыхания отношение FEV1/FVC является чувствительным параметром оценки ограничения воздушного потока. У пациентов, включенных в настоящее исследование, достоверных различий между группой курящих и некурящих по показателям спирографии не установлено, что можно объяснить молодым возрастом обследуемых, относительно небольшим стажем курения, не превышающим 5 лет, индексом курения, не превышающим критической величины 120. При анализе показателей крови не выявлено каких-либо достоверных различий между группой курящих и некурящих. Компоненты табачного дыма при курении, могут существенным образом изменять функцию слизистого эпителиального барьера и состояние мукозоассоциированной лимфоидной ткани. Таблица 5. Показатели врожденного и приобретенного мукозального иммунитета слюны у обследуемых студентов Показатели Группа курящих n=90 Группа некурящих n=30 Р Mе Q25% -Q75% Mе Q25%-Q75% Белок, мг % 181,5 138-210 306 230-372 Муцин, мг % 76 40-138 46 24-88 Лактоферрин нг/мл 8120 7080-9880 2860 1560-4680 CH50, усл.ед. 44,9 43,8-46,9 39,05 33,7-42,7 >0,05 C1, эф. мол. х 108/мл 2,65 1,2-3,9 1,8 0,1-2,9 C2, эф. мол. х 108/мл 1,45 0,7-2,8 1,2 0,3-2,2 >0,05 C3, эф. мол. х 108/мл 2,1 0,4-4 2,3 0,7-3,1 >0,05 C4, эф. мол. х 108/мл 1,75 0,5-4,3 1,8 0,4-2,7 >0,05 C5, эф. мол. х 108/мл 1,9 0,8-2,7 2,2 1,3-5,2 IgG,мкг/мл 1,31 0,8-1,9 0,6 0,4-0,9 SlgA, мкг/мл 315,2 268,8-373,2 139,4 117,6-178 TNF -α, пг/мл 6,045 3,18-9,81 0,01 0,01-0,45 IL-8, нг/мл 64,62 50,1-72,5 43,84 20,5-53,4 NO2, мкМоль/л 2,15 0,2-5,2 1,3 1-2,3 NOх мкМоль/л 19,65 11-31 11,2 6,8-15,6 NO3, мкМоль/л 17,5 18,7-30,6 9,9 6-14 Примечание: р - достоверность различий между курящими и некурящими . Как видно из таблицы 5, имеются статистически значимые различия в количественных характеристиках большинства изучаемых показателей слюны у курящих и некурящих молодых людей. Обнаружено в группе курящих более низкое содержание общего белка в слюне, что может быть связано с уменьшением уровня продукции белка в составе слюнной жидкости, с усилением саливации под влиянием раздражающих агентов табачного дыма. Анализ состояния показателей врожденного мукозального иммунитета слюны у курящих молодых людей показывает, что на фоне снижения общего белка в слюнной жидкости у них происходит рост таких показателей, как муцин, лактоферрин, меняется активность отдельных компонентов системы комплемента. Так, у курящих выявлено достоверное повышение содержания муцина в слюне (р У курящих студентов в сопоставлении с группой некурящих в слюне отмечается рост содержания лактоферрина, источником которого являются нейтрофилы. Почти трехкратный рост уровня лактоферрина может отражать усиление секреции данного биологически активного компонента лейкоцитами, либо в результате активации функции каждой клетки-продуцента, либо вследствие усиления эмиграции нейтрофилов из сосудов в секреты респираторного тракта в результате действия табачного дыма. Лактоферрин, как известно, обладает выраженными антимикробными свойствами в результате осуществления транспортной функции железа, конкурируя за связь с ним с патогенными микробами, но вместе с тем он относится к острофазовым белкам воспаления, является маркером усиления секреторной функции лейкоцитов. Общая активность системы в слюне у курящих студентов, а также активность таких компонентов, как С3, С4, участвующих в активации системы по классическому пути, достоверно не меняется. Активность С1 компонента, имеющего ключевое значение в инициации активации системы достоверно растет, в то время как один из терминальных компонентов (С5), имеющий ключевую роль в регуляции иммунного ответа, его поляризации в определенном направлении, в развитии эндогенного воспаления, напротив, уменьшается. Формирование дисбаланса активности компонентов классического пути отражает, вероятно, усиление начального этапа активации системы комплемента по классическому пути и потребление образующихся продуктов расщепления С5, которые являются анафилотоксинами и прикрепляются к тучным клеткам, вызывая их дегрануляцию, а также являются хемоаттрактантами, привлекающими в очаг активации лейкоциты. Нами был проведен анализ состояния цитокин- и нитроксидергической регуляции у курящих молодых людей на основе изучения конечных стабильных метаболитов оксида азота и определения количества провоспалительных цитокинов TNF–α и IL-8 в слюне. Выявление у курящих молодых людей в сравнении с некурящими роста уровня муцина, продуцируемого бокаловидными клетками, лактоферрина, источником которого являются лейкоциты, изучаемых иммуноглобулинов в слюне, продуцируемых плазматическими клетками МАLТ и других периферических органов иммунной системы, уровня NO, источником которого являются эндотелиоциты и макрофаги, IL-8, продуцируемого эпителиоцитами и макрофагами, позволяет констатировать стимулирующий эффект табакокурения на клетки, обладающие секреторными функциями. При этом многие анализируемые вещества (лактоферрин, белки системы комплемента, NO, TNF–α , IL-8) являются не только микробоцидными факторами, но и общепризнанными медиаторами воспаления, могут оказывать существенное влияние на флогогенный потенциал секретов слизистых оболочек. Анализ характера взаимосвязей между иммунологическими показателями слюны у некурящих студентов отражает таблица 6. Таблица 6 Корреляционная зависимость между иммунологическими показателями у некурящих молодых лиц Показатели R Spearman P Количество белка – SIgA +0,377 Количество белка – IgG +0,413 Количество муцина -СН50 +0,403 Количество муцина - NO2 -0,403 Активность C3 - C4 +0,448 Активность C3 – количество лактоферрина -0,419 Всего достоверных связей 6 В группе некурящих всего установлено достоверных корреляционных связей средней силы (6), при этом превалировали положительные корреляционные связи (4). Выявлены позитивные корреляционные связи между количеством белка в слюне и уровнями иммуноглобулинов (SIgA, IgG), между количеством муцина и общей активностью комплемента, а также между активностью компонентов комплемента (С3, С4). Отрицательные связи установлены для пар: количество муцина и уровень NO2, а также активность С3 и уровень лактоферрина. Иной характер корреляционных взаимосвязей выявлен у курящих студентов между иммунологическими показателями слюны, представленный в таблице 7. Таблица 7. Корреляционная зависимость между иммунологическими показателями слюны у курящих молодых лиц Показатели R Spearman P Количество белка – активность С2 -0,395 Количество белка – активность С4 -0,683 Количество белка – активность С5 -0,299 Количество муцина - активность С4 -0,854 Количество муцина – IgG -0,746 Количество муцина - IL-8 -0,385 Количество муцина - TNF-α -0,708 ^ TNF-α- NO3 -0,839 TNF-α –кортизол -0,732 Всего связей 9 Во-первых, у курящих студентов по сравнению с некурящими несколько увеличилось общее число достоверных корреляционных связей между изучаемыми показателями слюны (9 против 6), во-вторых, появились связи не только слабой и средней силы, но и сильные. В-третьих, все выявленные связи были негативными, в то время как в группе у некурящих встречались и позитивные связи (4 против 2). В-четвертых, появились отсутствующие у некурящих молодых лиц отрицательные корреляционные связи между содержанием общего белка в слюне, с одной стороны, и активностью отдельных компонентов комплемента - с другой. Как следует из определения общего белка слюны и активности комплемента у курящих и некурящих студентов (таблица 5), уровень общего белка у курильщиков снижается, активность С1 белка растет, а С5 достоверно падает. При этом выявлены отрицательные корреляционные связи между уровнем общего белка и активностью С2, С4, С5. Иными словами, чем больше снижается уровень общего белка в слюне у курильщиков, тем больше увеличивается активность С2, С4, С5 компонентов комплемента, что вероятно, отражает локальное усиление продукции этих компонентов макрофагами ротовой полости при действии табачного дыма на клетки. Выявлена отрицательная достоверная взаимосвязь между уровнем муцина в слюне и активностью компонентов комплемента С4, свидетельствующая о росте активности С4 при снижении количества муцина в слюне и наоборот, о ее снижении при росте количества муцина. Только у курящих студентов, у которых достоверно растет в слюне количество муцина в сопоставлении с некурящей группой, появляются отрицательные достоверные корреляционные связи между уровнем муцина и количеством в слюне иммуноглобулинов (IgG), а также провоспалительных цитокинов (IL-8 и особенно TNF-α). Негативная связь между количеством муцина и уровнем иммуноглобулинов в слюне, вероятно, определяется ключевой ролью муцина в обеспечении антиколонизационной защиты слизистых оболочек, в результате рост или снижение уровня муцина приводит к колебанию потока антигенов, проникающих через мукосаливарный барьер, и, вероятно, в меньшей степени влияет на проницаемость барьера для обратного тока транспортируемых в слюну иммуноглобулинов. Колебания продукции муцина бокаловидными клетками слизистых оболочек, вероятно, влияют также на контакт профессиональных антиген-представляющих клеток (АПК), эпителиоцитов ротовой полости с антигенами, для которых муцин является «ловушкой», уменьшающей контакт антигенов с АПК и эпителиоцитами и рецепцию последними внеклеточных сигналов, это может существенно менять уровень продукции цитокинов (IL-8, TNF-α) клетками в зависимости от количества муцина в слюне по обратно пропорциональному принципу. Только у курящих студентов выявленная достоверная и сильная отрицательная корреляционная связь между уровнями TNF-α и NO3, что подтверждает роль оксида азота, как универсального мессенджера в регуляции функций различных клеток, включая иммуноциты, продуцирующие цитокины. Корреляционный анализ выявил отрицательную корреляционную связь между уровнями TNF-α и кортизола в слюне, что свидетельствует о регулирующей роли стрессовых гормонов в обеспечении функций иммунной системы. Достоверное влияние кортизола на содержание TNF-α в слюне выявлено только у курящих студентов, у которых установлен более высокий уровень данного гормона надпочечников в слюне, чем у некурящих. Эффект кортизола на продукцию TNF-α иммунными клетками ротовой полости может быть опосредован рецепторами для гормона на макрофагах и других АПК, наличие которых установлено на иммуноцитах (Felten D.L., Maida M.E., 2002). Для анализа взаимосвязи табакокурения и состояния мукозального иммунитета ротовой полости далее был проведен корреляционный анализ иммунных показателей слюны у студентов с высокой степенью НЗ (табл.8). Из таблицы 8 следует, что число достоверных связей между иммунологическими показателями слюны у студентов с высокой степенью НЗ оказалось равным 23 против 9 в общей группе курящих, все связи положительные. ^ В целом число связей увеличилось более чем вдвое, что само по себе отражает более выраженное возмущающее действие на мукозальный иммунный гомеостаз высокой степени табачной зависимости. Таблица 8. Корреляционные связи между иммунологическими показателями слюны у курящих молодых лиц с высокой степенью никотиновой зависимости Показатели R Spearman P Количество белка- SIgA +0,867 Количество белка – IgG +0,858 Количество белка - IL-8 +0,768 Количество белка – лактоферрин +0,256 Лактоферрин – IL-8 +0,419 Лактоферрин – кортизол +0,366 Лактоферрин - СН50 +0,752 NОx - NO2 +0,352 NОx - NO3 +0,360 NОx – С1 +0,284 NОx – С2 +0,427 NОx –ЛФ +0,284 TNFα- муцин +0,393 TNFα –СН50 +0,366 TNFα - С1 +0,420 TNFα –IgG +0,865 TNFα- SIgA +0,794 TNFα -IL-8 +0,684 IL-8 - СН50 +0,733 IL-8 – С1 +0,320 IL-8 – С5 +0,528 IL-8 – IgG +0,726 IL-8 – SIgA +0,695 Всего связей 23 Установлены достоверные положительные сильные корреляционные связи между уровнем общего белка в слюне, с одной стороны, и количеством SIgA, IgG, IL-8 – с другой. Слабая, но достоверная позитивная корреляционная связь выявлена при высокой НЗ между количеством белка в слюне и лактоферрина, продуценом которого являются в основном нейтрофилы ротовой полости. Усиление локальной продукции иммунных белков (иммуноглобулинов, IL-8, лактоферрина) способствуют параллельному росту в слюне уровня общего белка. Логичной представляется также связь между уровнем лактоферрина и IL-8, ибо лактоферрин продуцируется нейтрофилами, а IL-8 относится к хемокинам, которые образуется профессиональными и непрофессиональными антиген - представляющими клетками и усиливают приток и эмиграцию лейкоцитов из кровотока в ткани и биологические жидкости. Связь между уровнем лактоферрина в слюне и кортизолом также может объясняться усилением миграции лейкоцитов из центральных органов лейкопоэза на периферию под влиянием кортизола и с усилением секреции лактоферрина. Результаты корреляционного анализа подтверждают значимость систем комплемента, цитокинов и NO в регуляции функции врожденного и адаптивного иммунного ответа, о чем свидетельствуют выявленные связи между: системой NO и активностью компонентов комплемента, лактоферрина; системой цитокинов (IL-8, TNF-α, с одной стороны, и активностью системы комплемента, содержанием в слюне SIgA, IgG – с другой). Для анализа взаимосвязи табакокурения и состояния мукозального иммунитета ротовой полости далее был проведен корреляционный анализ иммунных показателей слюны у студентов с НЗ (таблица 9). Таблица 9. Корреляционные связи между иммунологическими показателями слюны у курящих молодых людей и никотиновой зависимостью Показатели R Spearman P Никотиновая зависимость - С2 +0,466 Никотиновая зависимость - С4 +0,464 Никотиновая зависимость – SigA +0,680 Никотиновая зависимость – IgG +0,362 Никотиновая зависимость - IL-8 +0,768 Никотиновая зависимость - TNF-α +0,827 Никотиновая зависимость - NOx +0,782 Никотиновая зависимость – ЛФ +0,817 Никотиновая зависимость - кортизол +0,829 Как видно из данных таблицы 9 выявлена достоверная связь количественных показателей мукозального иммунитета слюны с НЗ у обследуемых молодых людей. Так, достоверная позитивная корреляционная связь слабой силы с уровнем НЗ установлена для активности компонентов комплемента С2 и С4. Выявлена достоверная корреляционная связь между НЗ и уровнем IgG в слюне (r=0,362 при р Более высокий позитивный коэффициент корреляции и при более высокой степени достоверности установлен между степенью НЗ и количеством SIgA в cлюне ( r= 0,680 при р В таблице 10 приведен коэффициент корреляции для пары никотиновая зависимость – уровень кортизола в слюне, который был самым высоким среди изучаемых пар показателей (r =0,829 при р На первом этапе наших исследований был выбран электросон и электросонфорез (ЭСФ) с препаратом мексидол. В основе эффекта электросна лежит улучшение функционального состояния центральной нервной системы, корково-подкорковых взаимоотношений: таламус, гипоталамус, гипофиз, лимбическая система (Гуляев В.Ю., Оранский И.Е., 1995; Улащик В.С., Лукомский И.В., 2003). Лечебный процесс в виде курсовых воздействий завершается долговременной адаптацией организма с формированием структурно-метаболического следа, благодаря которому эффект лечения сохраняется в длительном периоде последствий (Зубкова С.М., 2006). Для изучения использовалось также сочетание электросонфореза (ЭСФ) с мексидолом. Мексидол является препаратом нового типа как по механизму, так и по спектру фармакологического действия и обладает существенными преимуществами перед известными нейро-психотропными препаратами. Молодые курящие пациенты были распределены методом рандомизации на две группы, получавшие разное лечение. В первую группу были включены пациенты (n=24), получавшие процедуры электросна с помощью аппарата «Электросон-10-5» (сила тока – до ощущения покалывания. Электросон проводили ежедневно, время воздействия 20 – 30 минут, с постепенным увеличением продолжительности каждой процедуры. Курс лечения – 6 процедур. Вторую группу (n=27) составили пациенты, которые получали процедуры ЭСФ с 5% раствором мексидола (2 мл) с помощью аппарата «Электросон - 10-5» в том же режиме, что и в первой группе. Процедуры проводили ежедневно, используя лобно-затылочное воздействие. Мы проанализировали анкеты, заполняемые студентами с высокой степенью мотивации к отказу от курения. Несомненно, идеальной ситуацией для любого индивидуума было решение отказаться от курения. Самостоятельному решению отказа от курения способствовало занятие спортом (60%), желание добиться успехов в спортивных соревнованиях, а также желание молодых женщин иметь здоровое поколение (25%) при создании семьи в ближайшем будущем. Положительное влияние имел запрет курения в общественных местах в 15%. Как уже отмечено выше, перед началом лечения проводилась индивидуальная психотерапия, основанная на убеждении и разъяснении риска, которому подвергает свой организм курящий человек, т.к. для получения конечного эффекта очень важны глубокое осознание этого риска и принятие на себя ответственности пациентом за свое здоровье. Оценку курительного поведения студентов проводили до и после лечения. Тип курительного поведения по анкете Д. Хорна до физиотерапевтического воздействия в большинстве случаев носил смешанный характер, преимущественно «расслабление», «поддержка» (у 42 пациентов), «игра с сигаретой» (у 9 пациентов). Курительные типы поведения «рефлекс» и «жажда», когда курят много, в любых ситуациях, в исследуемых группах не наблюдались. Сравнительная оценка изменения типа курительного поведения курящих студентов по анкете Д. Хорна до и после влия