Комплексные соединения, их биологическая роль (на примере хлорофилла и гемоглобина)

Московский государственный университет имени М. В. Ломоносова Факультет фундаментальной медицины Реферат на тему Комплексные соединения, их биологическая роль. Порфириновые комплексы Fe и Mg. Выполнил Москва - 2001 Содержание 1. Введение. Обзор комплексов. Функциональное строение порфиринов 2.

Гемоглобин строение, механизмы работы 3. Общий путь образования тетрапиррольных предшественников синтез основы. 4. Синтез гемоглобина и хлорофилла Биосинтез протогема Биосинтез хлорофиллов 5. Заключение. 6. Список использованной литературы Введение. Комплексные соединения в организмах обычно координируются ионами переходных металлов, например Mn, Co, Fe Vт.н. биологически активных. Содержание этих металлов в организмах очень мало, и уже из этого

можно сделать предположение, что значение комплексов доказанное прямым опытом это почти всегда так должно быть связано с катализом, т.к. именно активные катализаторы могут способствовать быстрым изменениям состава вещества, действуя в малых концентрациях. Также, комплексы переходных металлов могут играть роль переносчиков групп атомов и целых молекул, закреплять молекулы в определенном положении, поворачивать их, поляризовать и т.п. Металлы-комплексообразователи таб.1 относятся к группе жизненно важных, т.е.

присутствуют во всех здоровых тканях человека и диапазон их концентраций практически постоянен в каждой ткани, а исключение из организма приводит к тяжелым последствиям. здесь 24Энтерадля таблицы Обзор комплексов. Значение порфиринов. Для живых организмовживотных, растений, бактерий очень важны комплексные соединения металлов, в которых четыре координационных места занимает одна и та же частица, называемая порфином, содержащая четыре пирролоподобных цикла, соединенных

СН-группами рис. 1 Производными порфина являются порфирины. В порфиринах, в отличие от порфина, имеются боковые цепи вместо некоторых из 8 периферических пиррольных атомов водорода. Расположение и вид заместителей определяют название и специфические функции, соответствующего производного. В нормальном обмене веществ человека участвует т.н. Изомер III. Изомер I в значительных количествах появляется при довольно редком дефекте метаболизма.

Остальные изомеры у человека не встречаются. Некоординированные чистые порфирины не проявляют биологической активности в организме человека, они работают только в комплексе с металлами гем комплекс порфирина и иона железа. В некординированном виде порфирины встречаются в качестве пигментов в скорлупе яиц, птичьих перьях и покровах червей. Порфирины это ярко окрашенные соединения. К ним в настоящее время относятся представители многочисленного класса циклических ароматических соединений,

содержащих многоконтурную сопряженную систему, в основе которой лежит шестнадцатичленный макроцикл, состоящий из четырех молекул пиррола и мостиков. У порфиринов, имеющих красный цвет, пирролы соединены между собой метиновыми мостиками, и тогда макроцикл носит название порфин1. В хлорофиллах, для которых характерна зеленая окраска, частично гидрированы один или два пиррола и молекула носит название хлорин2 или бактериохлорин3. Для кобаламинов, важнейшим из которых является витамин

В12, все четыре кольца частично гидрированы и вместо одного метинового мостика имеется непосредственная связь между пирролами. Этот цикл называется коррином4. здесь 15Энтеровдля 1Й картинки из БИОСИНТЕЗА В составе гемоглобина, миоглобина, цитохромов, каталазы и пероксидазы порфирины выступают в виде комплексов с ионами железа гемов. Хлорофиллы и бактериохлорофиллы содержат магний. Витамин В12 и родственные ему кобаламины, как следует из названия, имеют в качестве центрального иона

кобальт. В организмах встречаются комплексы, в которых некоторые атомы водорода в порфине замещены на метильные и винильные остатки пропионовой кислоты протопорфирины. Известны 15 возможных изомерных структур. Однако основной каркас этой сложной молекулы сохраняется во многих сложных веществах гемоглобине, цитохромах, витамине В12. Ион металла замещает атомы водорода двух пиррольных колец.

Связи металла с четырьмя атомами азота двух других пиррольных колец, которые лежат в одной плоскости, благодаря эффекту резонанса рассматриваются как одинаковые. Важнейшим свойством порфиринов является наличие в молекуле координационной полости, ограниченной атомами азота, N4, имеющей радиус около 2Е и способной координировать ионы металлов М2, М3, М4 и даже с большей степенью окисления. В результате комплексообразования образуются комплексные

соединения порфиринов, т.н. металлопорфирины, обладающие многообразными структурными и химическими особенностями, высокой биологической и каталитической активностью. При этом металл либо занимает центр полости N4 и оказывается в экваториальной плоскости xy, образуя плоский координационный узел из атомов MN4, либо оказывается приподнятой над плоскостью, в которой лежат атомы N4 и образует координационные узлы различной геометрической структуры от терагоналной пирамиды

LMN4 рис. 2 и октаэдра L1L2MN4 рис. 3 до более сложных геометрических фигур. Выход центрального атома из плоскости происходит, как правило, при донорно-акцепторном взаимодействии с молекулой L. Если металл М способен присоединить вторую молекулу L той же природы с противоположной стороны плоскости xy, то он возвращается в центр плоскости N4. Лиганды L1, способные вступать в координационную сферу металла, уже занятую четырьмя атомами азота

порфирина, называются аксиальными. Возможности молекул металлопорфиринов выступать в биологических процессах в качестве биокатализаторов ферментов значительно расширяется в связи с специфическим строением порфиринов и их комплексов, необычайным своеобразием их свойств и чрезвычайно большим структурным многообразием. Структурное многообразие связано с многочисленными путями химической модификации молекул порфина за счет замещения атомов водорода. Известно большое число биологических систем, в структуре которых металлопорфирины

выполняют функции инициатора того или иного биологического процесса. Например, гем в составе гемопротеидов участвует в транспорте кислорода гемоглобин, клеточном дыхании цитохромы, утилизации пероксидов каталаза. Наибольшее число исследований посвящено гемоглобину, гему крови, и процессам обратимой фиксации атмосферного кислорода на биологических и модельных системах. Рассмотрим функциональные особенности и механизмы работы гемоглобина, как наиболее хорошо изученные.

Гемоглобин Потребление атмосферного кислорода живыми организмами важнейший биохимический процесс. Кислород транспортируется гемоглобином эритроцитов от легких к мышцам и удерживается в мышцах миоглобином. Гемоглобин и миоглобин представляют собой комплексы железа, в которых группа ферропротопорфирина гема содержит Fe III рис.4 Пятое координационное число занимает азот имидазола Im гистидинового остатка, через который осуществляется единственная связь группы гема с полипептидной

цепью белка. В настоящее время известны аминокислотный состав и последовательность аминокислот в гемоглобинах, выделенных из разных животных, места присоединения частиц гема, пространственная структура гемоглобина работы Перутца и др Гем локализован в расщелине между спиралями белка. Одна молекула гемоглобина, состоящая из четырех белковых субъединиц глобулл, содержит четыре гема и, следовательно, четыре атома железа. Поскольку кислород в гемоглобине непосредственно фиксируется железом,

то такая молекула может, постепенно насыщаясь, присоединить четыре молекулы кислорода. В молекуле миоглобина полипептидная цепь координирована железом гем-группы так же как в гемоглобине. Однако, в отличие от гемоглобина молекула миоглобина состоит из одной белковой субъединицы и содержит одну гемовую единицу. Структуры окси- и дезокси-форм различны, и это различие не исчерпывается тем, что одна из них содержит молекулы кислорода, а другая нет.

При отсутствии кислорода атом Fe II в гемоглобине имеет координационное число 5, связан донорно-акцепторными связями с четырьмя координирующими атомами азота протопорфирина и одной менее прочной связью с третичным атомом азота проксимального имидазольного фрагмента гистидина рис. 5. Координационный узел Fe N4 N Im представляет собой квадратную пирамиду с атомом железа, удаленным от основания пирамиды на 0.8 Е. Шестое координационное место не в состоянии занять ни один из имеющихся

поблизости лигандов в том числе и Н2О, кроме молекулярного кислорода. Молекула О2 вызывает оксигенирование гемоглобина, а точнее иона Fe II. При этом комплекс Fe N4 N Im из высокоспинового пирамидального состояния в низкосипновое октаэдрическое искаженное состояние с координационным узлом Fe N4 N Im О2. Под влиянием кристаллического поля N-донорных атомов порфирина, а также аксиальных лигандов

Im и О2 t42ge2g конфигурация Fe II превращается в t62ge0g. На вакантные eg -орбитали переходят сигма-электроные пары имидазола и кислорода. Считают, что молекула О2 связывается в шестом координационном месте с Fe II также за счет дативной р-связи. Координированный ион железа поставляет пару электронов, находящуюся на его dyz или dxz-орбитали, на вакантную разрыхляющую pz-орбиталь молекулы

О2. Образованию р-связи Fe II О2 благоприятствует высокая электроннодонорная способность р-системы и проксимального имидазола. Атом железа после оксигенации входит в координационную плоскость N4 и располагается ценртосимметрично. Структура белка в гемоглобине такова, что он экранирует подход к атому Fe II всех других молекул, имеющихся в крови, и своевременно регулирует его донорно-акцепторные свойства. Исключение составляют токсиканты яды крови, к которым относятся монооксид углерода, оксиды

азота, метиленовый синий. Проникая с атмосферным воздухом в легкие, монооксид углерода быстро преодолевает капиллярно- альвеолярную мембрану, растворяется в плазме крови, диффундирует в эритроциты и вступает в обратимое химическое взаимодействие как с окси так и с дезоксигемоглобином HbО2 CO HbCO О2 Hb CO HbCO, где Hb гемоглобин. Образующийся комплекс карбоксигемоглобин HbCO не способен присоединять к себе кислород. В молекуле гемоглобина

СО координируется атомом железа , вытесняя О2. Одна молекула гемоглобина точнее, четыре е гема может присоединить до четырех молекул СО. Важным производным гемоглобина является метгемоглобин, в молекуле которого атом железа находится в степени окисления 3. Метгемоглобин не связывает молекулярный кислород. Он образуется при воздействии на гемоглобин окислителей оксидов азота, метиленового синего, хлоратов. Образование метгемоглобина в крови уменьшает количество

в ней функционально важного оксигемоглобина и нарушает доставку кислорода к тканям. Комплексы железа с порфиринами участвуют не только в транспорте кислорода, но и выполняют множество других функций. Среди них процесс переноса электронов. Общий путь образования тетрапиррольных предшественников Начало исследований принято относить к 1945 году, когда молодой американский ученый

Шемин поставил эксперимент на собственном организме, приняв порцию простейшей аминокислоты глицина, которая отличалась от обычной аминокислоты заменой изотопа 14N на 15N. Через некоторое время он выделил из крови гемоглобин затем гемин, содержащий повышенное количество изотопа 15N. Позднее было показано, что глицин конденсируется с сукцинил-коэнзимом А, давая д-аминолевулиновую кислоту д-АЛК. Этот процесс катализируется ферментом

АЛК-синтетазой, его обязательным участником является фосфорилированная форма витамина В6 пиридоксальфосфат. Последующими исследованиями было доказано, что д-АЛК выступает в качестве общего предшественника в биосинтезе всех природных тетрапиррольных пигментов. Описанное образование д-АЛК характерно для животных и ферросинтетических бактерий. В растениях и у некоторых прокариотов д-АЛК синтезируется из глютаминовой кислоты. здесь 24Энтерадля 1Й

схемы из БИОСИНТЕЗА Две молекулы д-АЛК под действием фермента порфобилиноген-синтетазы конденсируются в молекулу пиррола, получившего название порфобилиноген ПБГ. Следующая стадия биосинтеза превращение четырех молекул ПБГ в макроцикл уропорфириноген III Уро ген III. Конденсация ПБГ в Уро ген III состоит из двух этапов. На первом происходит полимеризация

ПБГ под действием фермента ПБГ-деаминазы в линейный тетрапиррол. На втором в присутствии фермента косинтетазы происходит не только замыкание билана в макроцикл, но и поворот одного из пиррольных колец пиррола D с образованием природного изомера III типа Уро гена III. При отсутствии косинтетазы билан замыкается в другой изомер Уро ген I, который в последующем биосинтезе не участвует это очень редкая патология обмена веществ у

человека. Только при наличии двух ферментов дезаминазы и косинтетазы ПБГ замыкается в изомер III типа. Отдельно взятая косинтетаза не полимеризует ПБГ и не в состоянии изомеризовать Уро ген I в Уро ген III. Лишь в начале 90-х годов был окончательно раскрыт механизм образования Уро гена III. здесь 27Энтеровдля 2Й схемы из БИОСИНТЕЗА

После получения дезаминазы высокой степени чистоты генноинженерными методами стало возможным показать, что фермент Е содержит активный центр кофактор, состоящий из двух соединенных между собой молекул ПБГ. Этот дипирролилметан ковалентно связан с белком через атом серы остатка цистеина. Молекулы ПБГ последовательно присоединяются к дипирролилметану с потерей NH3, образуя цепочку из трех ES1, четырех ES2, пяти

ES3 и шести ES4 пирролов, причем все присоединения происходят по типу голова к хвосту, и, следовательно, полипиррольная цепь имеет регулярно чередующиеся заместители А-Р-А-Р-А-Р- и т.д. После присоединения четвертой молекулы ПБГ тетрапиррольная цепочка отделяется с образованием оксибилана. Дипирролилметан дезаминазы снова готов к наращиванию полипиррольного ансамбля схемаv. здесь 14Энтеровдля 3Й

схемы из БИОСИНТЕЗА Наличие простетичсекой группы в дезаминазе, построенной из молекул, подобных субстрату, явление необычное для ферментов. Известно только, что, действуя на дезаминазу сильными кислотами, удается отщепить депирролилметан. Полученный апофермент уже не обладает каталитической активностью. Лишь после присоединения двух первых молей ПБГ при определенном pH дезаминаза снова становится способной к обратимому присоединению четырех молекул ПБГ. Синтезированный оксибилан под действием второго фермента

косинтетазы превращается в Уро ген III. Для этой циклизации, сопровождающейся обращением пиррольного кольца D, за долгие годы изучения этой реакции предложено свыше двух десятков механизмов. В настоящее время наиболее обоснованным представляется поворот кольца D за счет образования спиро-структуры на схеме. После образования Уро гена III происходит первое разветвление путей биосинтеза тетрапиррольных пигментов.

Декарбоксилирование Уро гена III ведет к порфиринам и хлорофиллам, а С-метилирование через прекоррин-1 к витамину В12 и другим кобаламинам. Синтез гемоглобина и хлорофилла Биосинтез протогема Рассмотрим путь, ведущий к главному порфирину в живом организме протопорфирину IX и его железосодержащему комплексу протогему. Превращение

Уро гена III под влиянием соответствующего фермента включает последовательное декарбоксилирование остатков уксусной кислоты до метильной группы с образованием копропорфириногена III Копро ген III. Декарбоксилирование начинается с кольца D и далее продолжается по часовой стрелке через кольца А,В и С. Имеются также данные, что в определенных условиях возможен и иной порядок декарбоксилирования.

здесь 29Энтеровдля 4Й схемы из БИОСИНТЕЗА Копро ген III под действием копропорфириногеноксидазы подвергается окислительному декарбоксилированию. В результате два остатка пропионовой кислоты в положениях 3 и 8 превращаются в винильные группы и образуется протопорфирин IXПрото IX. На этом участке происходит дальнейшее разветвление путей биосинтеза. Введение ионов двухвалентного железа фермент феррохелатаза приводит к образованию протогема, который

является простетической группой в многочисленных природных белках гемопротеидах. Биосинтез хлорофиллов Включение в Прото IX магния начинает новую цепь биосинтетических превращений, ведущую к хлорофиллу а, бактериохлорофиллу и другим зеленым пигментам, общее количество которых на сегодня превышает 50 типов. Ниже приведена схема, основных превращений магниевого комплекса Прото IX в хлорофилл а Хл а. здесь 35Энтеровдля 5Й схемы из

БИОСИНТЕЗА Существенным отличием этой ветви биосинтеза от ранее рассмотренной является то, что при биосинтезе Прото IX большая часть промежуточных соединений находится в растворах, перемещаясь от одного фермента к другому, причем сами ферменты также по большей части растворены в цитоплазме клетки. Биосинтез хлорофиллов, напротив, протекает только в хлоропластах, все ферменты закреплены в мембранах и часто образуют сложные ассоциаты. Это значительно затрудняет изучение отдельных стадий, механизмов

превращений промежуточных соединений, и, в связи с этим, общая картина биосинтеза Хл а остатся менее ясной.В целом же о биосинтезе известно следующее. После введения иона магния происходит этерификация остатка пропионовой кислоты в положении 13. Далее этот остаток окисляется через несколько промежуточных стадий, давая после замыкания кольцо Е12. Затем происходит восстановление винильной группы до этильной в положении 8 с образованием 3-винилпротохлорофилла13.

Следующая важная стадия включает в себя восстановление двойной связи в кольце D. Исключительно важную роль играет при этом освещение растений. Показано, что в отсутствии света у высших растений накапливается протохлорофиллид. Даже короткая световая экспозиция приводит к превращению протохлорофиллида в хлорофиллид14. В то же время, низшие растения и водоросли могут синтезировать хлорофиллид и при отсутствии света.

На заключительном этапе происходит этерификация хлорофиллида природным спиртом фитолом при участии особого фермента хлорофиллсинтетазы. В результате образуется хлорофилл а 15. здесь 18Энтеровдля Хл b и БХл а из БИОСИНТЕЗА Пути биосинтеза других хлорофиллов, а также бактериохлорофиллов изучены пока недостаточно. Известно, однако, что все эти пигменты образуются через Хл а. В случае хлорофилла b происходит окисление метильной группы в положении 7 до формильной 16.

Образование самого распространенного среди бактериохлорофиллов а изомера 17 включает превращение винильной группы в ацетильную, гидрирование второго пиррольного остатка В и этерификацию остатка пропионовой кислоты фитолом. Заключение Металлопорфирины являются макроциклическими комплексами, и это накладывает отпечаток на их строение и свойства. Однако, они отличаются от бесчисленного множества других групп макроциклических

комплексов тем, что являются ароматическими макроциклами с уникальной сопряженной р-системой. Ароматичность порфиринов определяет их электроннодонорные свойства, то есть способность к снижению локальных положительных и отрицательных зарядов путем их распределения по ароматическим орбиталям. Вследствие этого стабилизируются катион- и анион-радикальные формы, а также различные степени окисления металлов, возникающие в процессе функционирования биологически активных соединений на основе металлопорфиринов.

Изложенные здесь пути биосинтеза протогема и хлорофилла а показывают, насколько близко переплетаются фундаментальные процессы жизнедеятельности в бактериях, высших растениях и животном мире. При значительных различиях объектов исследования в рассмотренных схемах используются близкие или общие методы построения промежуточных соединений. Успешное раскрытие путей биосинтеза пигментов жизни можно рассматривать как важный этап в развитии современной молекулярной биологии и биохимии.

Полученные знания могут быть использованы и в медицинской практике в борьбе с определенными наследственными заболеваниями, при химических отравлениях и других процессах, связанных с нарушениями биосинтеза гемопротеидов. Примером успешного использования биосинтеза гема явился предложенный недавно модифицированный метод фотодинамической терапии рака, основанный на введении в организм пациента д-АЛК, которая превращается в Прото IX, а последний накапливается в злокачественных опухолях

Статья А.Ф. Миронова в СОЖ 8 за 1996, С.32. Список использованной литературы 1. Блюменфельд Л.А. ГемоглобинСОЖ, 4, 1998 2. Миронов А.Ф. Биосинтез тетрапиррольных пигментовСОЖ, 7, 1998 3. Улахович Н.А. Комплексы металлов в живых организмовСОЖ, 8, 1998 4. Tradeth A. et al. Clinical chemistry, L

Oxford University press, 1976