Федеральное государственное учреждение науки «Екатеринбургский медицинский научный центр профилактики и охраны здоровья рабочих промпредприятий»Реферат отчета По Государственный контракту № 47 от 31.03.2008 г.«Разработка и экспериментальная апробация комплекса средств биологической профилактики влияния радиоактивных и иных факторов риска на здоровье населения, проживающего в районе размещения базы хранения монацитового концентрата в Красноуфимском районе». Руководитель работ Заслуженный деятель науки РФпроф.-д.м.н._____________Кацнельсон Б.А. Ответственный исполнитель проф.-д.м.н._______________Привалова Л.И. В марте — ноябре 2008г. в Отделе токсикологии и биопрофилактики ЕМНЦРиОЗРПП было проведено экспериментальное исследование по оценке вредных воздействий на организм монацитового концентрата, а также по разработке биопрофилактического комплекса (БПК), включающего безвредные при длительном применении препараты, направленные на повышение неспецифической устойчивости организма к вредным воздействиям, усиление антиоксидантной защиты, противодействие генотоксичности (и, тем самым, потенциальной канцерогоенности) радиоактивных частиц монацитового концентрата и усилению их пневокониозоопасности, связанному с радиоактивностью. В качестве профилактических биопротекторов применялись глутаминовая кислота; физиологические антиоксиданты (витамины А, Е, С, микроэлемент - селен); аминокислота метионин; йод – как стимулятор биоэнергетических процессов клетки. В состав биопрофилактического комплекса (БПК) входили: глутаминат натрия, метионин, препарата йодистого калия («йодомарин»), поливитаминно-полиминеральный препарат “СЕЛМЕВИТ”, который содержит важнейшие витамины, а также кальций, марганец, железо и селен. Кроме того рассматривалось защитное действие препарата «Эйкозавитол» (как в составе описанного выше БПК, так и отдельно), в составе которого имеются полиненасыщенные жирные кислоты (в основном, группы омега-3), которые не только повышают активность антиоксидантной системы организма, но и являются предшественниками внутриклеточного образования эйкозаноидов, способствующих репарации ядерной ДНК, повреждаемой генотоксическим действием вредных веществ и ионизирующего излучения и апоптозу клеток с не репарированными повреждениями.Экспериментальные исследования проводились на шести группах животных (белые беспородные крысы). Группа «монацит» подвергалась введению монацитового концентрата; группа «монацит + БПК» подвергалась введению монацитового концентрата на фоне приема выбранного БПК; группа «монацит + БПК + Эйкозавитол» подвергалась введению монацитового концентрата на фоне приема выбранного БПК с добавлением препарата «Эйкозавитол»; группа «монацит + Эйкозавитол» подвергалась введению монацитового концентрата на фоне приема препарата «Эйкозавитол»; группа «контроль на БПК + Эйкозавитол» получала БПК вместе с препаратом «Эйкозавитол» без введения пыли монацитового концентрат; группа «контроль интактный» не принимала БПК и не подвергалась введению монацитового концентрата.Исследования проводились в два этапа. В краткосрочном эксперименте были изучены цитотоксический эффект пыли и цитопротекторное действие БПК на основе оценки клеточного состава жидкости бронхо-альвеолярного лаважа (БАЛЖ) [1, 2]. В хроническом эксперименте через шесть месяцев после интратрахеального введения пыли по системе информативных показателей исследовали развившиеся эффекты действия частиц монацитового концентрата на клеточном и организменном уровнях и их изменения на фоне применения биопрофилактического комплекса. Велось наблюдение за общим состоянием организма крыс, динамикой прироста массы тела. Состояние нервной системы характеризовалось суммарно-пороговым показателем (СПП). Определялись массовые показатели лёгких, трахеобронхиальных лимфоузлов, щитовидной железы, печени, почек, надпочечников и селезёнки. В периферической крови определяли содержание ретикулоцитов, лимфоцитов, нейтрофилов, эозинофилов, тромбоцитов, эритроцитов и гемоглобина общепринятыми методами. Для оценки состояния перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы организма исследовали содержание в крови малонового диальдегида и активность каталазы. Для оценки состояния печени в крови определяли содержание общего белка, активность аланин-аминотрансферазы (АлТ) и аспартат-аминотрансферазы (АсТ). В качестве показателей состояния биоэнергетического и окислительно-восстановительного обмена использовали определение активности сукцинатдегидрогеназы (СДГ) лимфоцитов крови [3]. Развитие пневмокониотических изменений оценивалось путём гистологического исследования лёгких и трахеобронхиальных лимфоузлов [4] и по количественным показателям (изменение массы легких и содержания в них общего оксипролина и суммарных липидов с использованием методик [5, 6]). Состояние щитовидной железы оценивалось путем гистологического исследования (с полуколичественной морфометрией) [7], и измерения массы органа, а так же по содержанию в крови аутоантител (АТ-ТГ и АТ-ТПО) гормонов (СТ3, СТ4, ТТГ). Состояние иммунной системы характеризовалось показателями индекса и активности фагоцитоза, НСТ – тест, содержанием иммуноглбулинов IgG, IgM, IgA, гамма-интерферона, лактоферина, интерлейкинов-2 и -8. Проводилось также морфометрическое исследование органов иммунной системы (тимус, селезенка и лимфоузлы [4, 8]). Оценка генотоксического действия монацита на организм и влияние БПК на этот эффект осуществлялась тестированием повреждения и репарации ДНК методом ДНК-комет [9, 10, 11] и анализом полиморфизма длин ампицилированных фрагментов (ПДАФ) [12, 13]. Статистическая обработка материала проводилась на персональном компьютере с помощью программ Excel; статистическая значимость различий между группами определялась с помощью t-критерия Стьюдента [14]. ^ Результаты экспериментов и их обсуждение. Исследование клеточного состава БАЛЖ у крыс сравнивавшихся групп показало, что пыль монацитового концентрата проявляет выраженные цитотоксические свойства, вызывая увеличение общей клеточности глубоких дыхательных путей, в основном, за счет резкого усиления притока нейтрофильных лейкоцитов (НЛ) (с 0,24 ± 0,05 в контроле до 42,96 ± 6,02 млн. клеток в группе «монацит») при только небольшом, однако статистически значимом, увеличении числа альвеолярных макрофагов (АМ) (с 1,90 ± 0,15 в контроле до 4,57 ± 0,80 в группе «монацит»). Такой характер реакции альвеолярного фагоцитоза типичен для действия цитотоксичной пыли [2] и интегрально характеризуется почти 9-кратным и статистически высоко значимым увеличением отношения НЛ/АМ (с 0,13 ± 0,03 в контроле до 10,18 ± 1,17 в группе «монацит»). У животных, которые были предварительно подготовлены месячным приёмом БПК, этот показатель значимо ниже (5,15 ± 0,67) за счёт существенного ограничения мобилизации нейтрофилов, причём при совместном действии БПК и Эйкозавитола отношение НЛ/АМ снижается наиболее эффективно (3,83 ± 0,24 ). В хроническом эксперименте показано, что через 6 месяцев после интратрахеального введения эта пыль вызывает в легких умеренные пневмокониотические изменения, интенсивность которых несколько снижается под действием БПК. Обнаружены: 1.Увеличение массы лёгких (0,430 ± 0,028 г сухой ткани в группе «монацит» по сравнению с 0,288 ± 0,016 г сухой ткани в контроле), причем аналогичные сдвиги имеются и для сырой массы лёгких, а также для массы лёгких, корригированной по массе тела. Значимых изменений данного показателя на фоне действия БПК и/или Эйкозавитола не обнаружено. 2.Увеличение интенсивности накопления в легочной ткани липидов по сравнению с животными, воздействию пыли не подвергавшимся (45,86 ± 2,22 мг в группе «монацит» сравнительно с 26,73 ± 1,80 мг в контроле). Как известно, этот сдвиг (связанный, в основном, с усилением липопектической функции лёгочных макрофагов, активируемых пылевыми частицами либо продуктами разрушения макрофагов под влиянием этих частиц) является при экспериментальных пневмокониозах одним из наиболее ранних (префибротических) изменений [15, 16]. При применении БПК (или БПК+эйкозавитол) у запыленных монацитовым концентратом животных в легочной ткани происходит статистически значимое ослабление его (в группе «монацит + БПК» общее содержание липидов в лёгочной ткани составляет 36,81 ± 3,41 мг, в группе «монацит + БПК + Эйкозавитол» соответственно 36,66 ± 3,95мг), менее выраженное ослабление дал один эйкозавитол (39,48 ± 2,51 мг). 3. Увеличение содержания в лёгочной ткани оксипролина (общее содержание которого в группе «монацит» 4 155 ± 302 мкг, тогда как в контроле 2 444 ± 100 мкг), причем данный показатель под действием БПК и особенно БПК + Эйкозавитол снижается (в группе «монацит + БПК» общее содержание оксипролина в лёгочной ткани составляет 3 788 ± 324 мкг, в группе «монацит + БПК + Эйкозавитол» соответственно 3 594 ± 380 мкг). О том, что речь идёт именно об ослаблении фиброгенеза, вызванного пылью монацита, свидетельствует отсутствие какого-либо влияния того же защитного комплекса на содержание оксипролина и липидов в лёгких интактных крыс (соответственно 2 656 ± 126 мкг и 29,33 ± 2,03 мг в группе «контроль на БПК и Эйкозавитол). Также наблюдается снижение удельного прироста оксипролина (в мкг га 1 мг остаточной массы пыли в лёгких)под действием БПК. Этот показатель был равен в группе «монацит» 0,0588 ± 0,0066, в группе «монацит + БПК» 0,0492± 0,00131, в группе «монацит + БПК + Эйкозавитол» 0,0374 ± 0,0014). 4. Влияние биопрофилактики на остаточную массу пыли (которая должна снижаться в результате показанного выше благоприятного влияния на реакцию альвеолярного фагоцитоза, являющуюся основным физиологическим механизмом самоочищения глубоких отделов лёгких от пыли) было также благоприятным, но слабым и статистически не значимым: в группе «монацит» эта масса равнялась 30,8±2,9 мг, в группе «монацит + БПК» - 25,6±2,5 мг, в группе «монацит + эйкозавитол» - 29,3±3,6 мг и в группе «монацит + БПК + эйкозавитол» - 27,1±3,3 мг. Умеренная степень этого положительного эффекта, по всей вероятности, связана с малой эффективностью физиологических механизмов самоочищения лёгких при высокой разовой пылевой нагрузке. Однако, как было показано выше, прирост содержания оксипролина снизился как в абсолютных показателях, так и в расчёте на единицу массу пыли, что может быть объяснено только торможением патогенетических механизмов, запускаемых разрушением макрофагов под влиянием пылевых частиц. По всей вероятности, при хронической ингаляционной экспозиции к относительно низким концентрациям монацитовой пыли за счёт цитопротекторного эффекта БПК может быть достигнуто и более существенное снижение её задержки в лёгких, то есть все защитные эффекты биопрофилактики будут ещё более выраженными. 5.Морфологические исследования. Пыль монацитового концентрата через 6 месяцев после интратрахеального введения вызывает в легких пневмокониотические изменения в виде диффузного умеренного склероза альвеолярных перегородок (сгущение, огрубение аргирофильного каркаса и разрастание коллагеновых волокон) и развития в толще альвеолярных перегородок множественных, мелких, неправильной формы клеточно-пылевых узелков, находящихся в 0-1 степени склероза (единичные тонкие аргирофильные волокна проникают внутрь этих образований). При введении биопрофилактических комплексов, клеточно-пылевые скопления определяются по большей части в просвете альвеол, значительно реже пылевые включения и клеточная реакция вокруг них обнаруживается в толще альвеолярных перегородок. При этом клеточно-пылевые скопления по периферии охвачены тонкими коллагеновыми волокнами, однако прорастания аргирофильных волокон внутрь клеточно-пылевых скоплений не наблюдается. По выраженности диффузного склероза различий между этими тремя группами не выявлено.Патогенный эффект монацитового концентрата не ограничивается исключительно местом его введения (легкие), о чем свидетельствует изменения (морфологические и функциональные) состояния органов и систем, непосредственно не связанных с местом введения монацита. Негативные эффекты монацита и ослабление их БПК характеризуются следующими признаками: 1.Наблюдается статистически значимое подавление активности сукцинатдегидроненазы (СДГ) лимфоцитов, у животных, запыленных монацитовым концентратом (736 ± 22 гранул в 50 лимфоцитах, в группе «монацит» по сравнению с 901 ± 36 в контроле), причём у животных, принимавших БПК и Эйкозавитол отдельно и в комбинации такого снижения не наблюдается (982 ± 31 гранул в 50 лимфоцитах, в группе «монацит + БПК», 876 ± 49 в группе «монацит + БПК + Эйкозавитол», 881 ± 26 в группе «монацит + Эйкозавитол» и 910 ± 17 в «контроле на БПК + Эйкозавитол». Это может говорить снижении негативного влияния на энергетический обмен в клетке под действием испытанных биопротектопров. 2.Снижается уровень каталазы в группе запыленной монацитовым концентратом (0,28 ± 0,03 ед.ОП. в группе «монацит» по сравнению с 0,39 ± 0,04 в контроле), что свидетельствует об угнетающем действии на антиоксидантную систему организма (АОС), чего не наблюдается на фоне приёма БПК (0,30 ± 0,05 ед.ОП. в группе «монацит + БПК», 0,30 ± 0,03 ед.ОП. в группе «монацит + БПК + Эйкозавитол», 0,39 ± 0,04 ед.ОП. в группе «монацит + Эйкозавитол» и 0,37 ± 0,03 ед.ОП. в «контроле на БПК + Эйкозавитол»). Увеличение содержания МДА, одного из конечных продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ), наблюдавшееся в группе, запыленной монацитовым концентратом, может как отражать угнетение АОС, так и говорить о прямом усилении свободно-радикальных процессов в данной группе, в частности, под влиянием радиоактивного излучения [15] (5,04 ± 0,19 мкмоль/л в группе «монацит» по сравнению с 4,07 ± 0,36 мкмоль/л в контроле). Под влиянием биопротекторов в запыленной группе отмечается снижение этого сдвига с потерей его статистической значимости по отношению к контрольному показателю (4,43 ± 0,23 мкмоль/л в группе «монацит + БПК», 4,52 ± 0,37 мкмоль/л в группе «монацит + БПК + Эйкозавитол», 4,88 ± 0,18 мкмоль/л в группе «монацит + Эйкозавитол» и 4,68 ± 0,13 мкмоль/л в «контроле на БПК + Эйкозавитол»). 3.Из анализа лейкоцитарного состава крови видно некоторое снижение числа нейтрофилов в группе, запыленной монацитовым концентратом, причём для более ранних форм, т.е. палочкоядерных нейтрофилов снижение числа статистически значимо относительно интактного контроля (0,80 ± 0,20 в группе «монацит» по сравнению с 2,20 ± 0,39 в контроле), тогда как под действием БПК это снижение не столь заметно (1,71 ± 0,48 в группе «монацит + БПК», 1,60 ± 0,37 в группе «монацит + БПК + Эйкозавитол», 1,70 ± 0,41 в группе «монацит + Эйкозавитол» и 1,87 ± 0,44 в «контроле на БПК + Эйкозавитол»). Это может косвенно свидетельствовать о подавлении гранулоцитопоэза под действием монацитового концентрата и о защите от этого эффекта (который предположительно может быть связан с влиянием внутреннего альфа-облучения на костный мозг) действием БПК и в меньшей степени – действием эйкозавитола. Оценка генотоксичности методами тестирования повреждения и репарации ДНК и анализа полиморфизма длин амплифицированных фрагментов (ПДАФ) показала, что монацитовый концентрат обладает генотоксическим эффектом, появляющимся увеличением фрагментации ДНК не только в моноцитах крови (то есть в клетках системы мононуклерных фагоцитов), но и в иммуно-компетентных клетках (лимфоцитах), причём и этот эффект тормозится испытанными биопротекторами, в особенности, сочетанием БПК и Эйкозавитола. В лимфоцитах периферической крови животных, в контрольной группе крыс из пяти градаций характеризующих состояние ДНК (практически неповрежденные клетки; клетки, имеющие низкий уровень повреждения ДНК, средний уровень повреждения ДНК, высокий уровень повреждения ДНК и полностью поврежденные клетки) наблюдается преобладание практически неповрежденных клеток (50,2 ± 3,1 %) и клеток, имеющих низкий уровень повреждения ДНК (29,5±4,55%). В группе «монацит», по сравнению с интактной контрольной группой наблюдается смещение количества поврежденных клеток в направлении среднего (28,27±2,54%) и высокого (35,73±3,8%) уровней повреждения ДНК, а также в класс полностью поврежденных клеток (17,64±2,87%), когда как количество неповрежденных клеток и клеток с низким уровнем повреждения ДНК (соответственно 9,09±1,89 и 9,27±1,57). В группе «монацит + БПК» процент клеток, относящихся к классам практически неповрежденных клеток и клеток с низким уровнем повреждения ДНК(13,71±2,51 и 13,71±2,23 соответственно), значимо выше, чем в группе «монацит». Показатели группы крыс, получавших в целях профилактики генотоксических эффектов монацита препарат «Эйкозавитол», также характеризуют его положительное действие. Это выражается в увеличении доли клеток с низким уровнем повреждений ДНК с 9,27±1,57% до 33,3±5,21 и уменьшении клеток с полностью поврежденной ДНК с 17,64±2,87% до 7,41±4,87% и клеток, имеющих средний и высокий уровень повреждения ДНК С4 с 35,73±3,8% до 17,08±6,95%. Совместное использование БПК и препарата «Экозавитол» в группе «монацит + БПК + Эйкозавитол» сопровождается максимальным положительным эффектом – повышением в 1,5 раза доли лимфоцитов, имеющих неповрежденную ДНК и ДНК (14,14±2,69) и в 3,75 раза с минимальным повреждением (44,14±4,23), а также снижением полностью поврежденных и клеток с высокой степенью повреждения (13,86±2,69 и 0,42±1,07). БПК и препарат «Эйкозавитол» не обладают самостоятельными генотоксическими эффектами и, напротив, дали при совместном применении некоторое ослабление фонового уровня фрагментации ДНК. Так, в сравнении с интактной группой наблюдается увеличение процента лимфоцитов с практически неповрежденной ДНК (61,69±4,11) и с ДНК имеющей низкий уровень повреждения (30,85±4,23) при некотором снижении количества клеток со средней степенью повреждения ДНК (7,00±3,56 в группе «Контроль на БПК + Эйкозавитол» по сравнению с 19,70±4,43в контроле). В моноцитах периферической крови крыс наблюдается сходное соотношение между группами, но при более выраженном генотоксическом эффекте монацита, что возможно, связано с фагоцитарной активностью, присущей этим клеткам (в отличие от лимфоцитов). Другими словами, хотя бы часть моноцитов, вероятно, содержит частицы введенной пыли, альфа-излучение которых непосредственно повреждает ядерную ДНК. На этом фоне защитное действие отчётливо видно при действии эйкозавитола и в особенности – его комбинации с БПК. Результаты исследования степени фрагментации образцов ДНК лимфоцитов периферической крови также указывают на генотоксический эффект запыления монацитом. В контрольной группе коэффициент фрагментации составил 0,083 ± 0,006, а в группе «контроль на БПК + Эйкозавитол» - 0,059 ± 0,003 (статистически значимо ниже), что еще раз подтверждает самостоятельный антимутагенный/репарогенный эффект используемых препаратов. В группе крыс, подвергавшихся затравке монацитом, коэффициент фрагментации повышен до 0,096 ± 0,031, что подтверждает генотоксический эффект монацита, хотя этот сдвиг статистически недостаточно значим. Вместе с тем, по сравнению с показателем этой группы снижение коэффициента фрагментации при действии монацита на фоне всех испытанных биопротекторов, статистически значимо. Наиболее существенную защиту ДНК от повреждения дала комбинация БПК и эйкозавитола (0,035 ± 0,001). Таким образом, как полуколичественные, так и количественные методы оценки повреждения ДНК указывают на генотоксический эффект запыления монацитом и тем самым – на его способность вызывать комплекс заболеваний, связанных с повреждением генома клеток (в частности, злокачественных новообразований). Комплексное применение БПК и Эйкозавитола, не обладающих самостоятельной генотоксичностью, может рассматриваться в качестве биопрофилактического средства для выраженного ослабления генотоксичности монацита.В морфологических исследованиях внутригрудных лимфатических узлов, щитовидной железы, селезёнки и тимуса показано негативное влияние монацитового концентрата на данные органы, а также ослабление этого влияния под действием БПК, причём более значимое снижение отрицательных эффектов монацита, связанных с его общим действием на организм происходит при совместном применении БПК и Эйкозавитола. В частности, при введении БПК совместно с Эйкозавитолом имеет место стимуляция лимфоидной ткани в органах иммунной системы: комплекс не только нивелирует угнетение (гипоплазию) лимфоидных фолликулов в селезенке и лимфатических узлах, вызванную воздействием пыли монацита, но и приводит к их гиперплазии и появлению вторичных фолликулов (светлых центров размножения). В тимусе также отмечается более благоприятная морфологическая картина при совместном использовании БПК и Эйкозавитола. В щитовидной железе под влияние такой защиты более значимо снижаются дегенеративные и дисрегенераторные изменения. В трахеобронхиальных лимфатических узлах пыль монацита вызывает огрубение аргирофильной стромы и начальные признаки склерозирования синусов внутригрудных лимфатических узлов. При введении обоих биопрофилактических комплексов эти явления в лимфатических узлах уменьшаются. Несмотря на генотоксическое повреждение лимфоцитов и на то, что при морфологическом и морфометрическом исследовании обнаружены изменения в центральных органах иммунной системы (селезёнке и тимусе), выраженных изменений со стороны исследованных гуморальных показателей иммунного статуса организма под действием монацитового концентрата обнаружено не было.Поскольку результаты исследований указывают на неблагоприятный характер воздействия частиц монацитового концентрата на организм, интенсивность которого снижается при регулярном приёме БПК, особенно в сочетании с препаратом «Эйкозавитол», рекомендуется проведение на группе жителей Красноуфимского района контролируемого курса биологической профилактики неблагоприятных эффектов действия монацитового концентрата с использованием испытанного в данном исследовании биопрофилактического комплекса, включающего препарат «Эйкозавитол». ^ Основные выводы. 1. Пыль монацитового концентрата проявляет выраженные цитотоксические свойства, вызывая увеличение общей клеточности глубоких дыхательных путей, в основном, за счет мобилизации нейтрофильных лимфоцитов. Через 6 месяцев после интратрахеального введения эта пыль вызывает в легких умеренные пневмокониотические изменения, которые проявляются увеличением массы лёгких, увеличением содержания в них оксипролина и липидов, а так же морфологическими изменениями. Применение биопрофилактического комплекса (БПК), в состав которого входят глутаминат натрия, метионин, йод в форме препарата «йодомарин», поливитаминно-полиминеральный препарат “СЕЛМЕВИТ”, ослабляет как цитотоксических эффект, так и пневмокониотические изменения, а при использовании БПК в комплексе с Эйкозавитолом (препаратом, обогащённым полиненасыщенными жирными кислотами, в основном, группы омега-3) достигается наилучший эффект. 2. Патогенный эффект монацитового концентрата не ограничивается исключительно местом его введения (легкие), о чем свидетельствует изменения (морфологические и функциональные) состояния органов и систем, непосредственно не связанных с местом введения монацита. Пыль монацитового концентрата снижает уровень биоэнергетического обмена (судя по активности СМДГ в лимфоцитах крови), угнетающе действует на антиоксидантную систему организма, а также вызывает (судя по содержанию МДА в крови) усиление интенсивности перекисного окисления липидов. Эти эффекты ослабляются при использовании БПК, Эйкозавитола и их сочетания, причём по некоторым эффектам (в частности, по морфометрическим показателям) именно такое сочетание наиболее эффективно. 3. Монацитовый концентрат при интратрахаельном введении обладает генотоксическим эффектом, появляющимся увеличением фрагментации ДНК не только в моноцитах крови (то есть в клетках системы мононуклерных фагоцитов), но и в иммуно-компетентных клетках (лимфоцитах), причём и этот эффект тормозится испытанными биопротекторами, в особенности, сочетанием БПК и Эйкозавитола. 4. Несмотря на генотоксическое повреждение лимфоцитов и на то, что при морфологическом и морфометрическом исследовании обнаружены изменения в центральных органах иммунной системы (селезёнке и тимусе), выраженных изменений со стороны исследованных гуморальных показателей иммунного статуса организма под действием монацитового концентрата обнаружено не было. 5. БПК и препарат «Эйкозавитол» не обладают собственными токсическими (и в том числе генотоксическими) эффектами, о чем свидетельствуют результаты исследований группы крыс, получавшей БПК и «Эйкозавитол» без затравки. 6. Рекомендуется проведение на группе жителей Красноуфимского района контролируемого курса биологической профилактики неблагоприятных эффектов действия монацитового концентрата с использованием испытанного в данном исследовании биопрофилактического комплекса, включающего препарат «Эйкозавитол». Список использованной литературы 1. Величковский Б.Т., Кацнельсон Б.А. Этиология и патогенез силикоза. М.: «Медицина», 1964. -179 с. Привалова Л.И. Гигиенические аспекты неспецифического действия малорастворимых цитотоксических пылевых частиц. Дисс. докт. мед. наук. - Свердловск,– 1990. 389с. Нарциссов Р.П. Применение п-нитротетразолия фиолетового для количественной цитохимии дегидрогеназ лимфоцитов человека/ Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. -1969. -№ 5. -С.85-91. Движков П.П. Пневмокониозы. М.: 1965, 280с. Еловская Л.Т., Воронцова Е.И., Капитанов Ю.Т., Рябов Н.А., Чеботарев А.Г., Иванова А.С., Латушкина В.Б., Архипова О.Г., Глкина К.А., Киреев В.И., Кириянов К.Е., Кацнельсон Б.А., Привалова Л.И., Бабушкина Л.Г. и др. Обоснование предельно допустимых концентраций (ПДК) аэрозолей в рабочей зоне. Методические рекомендации. М.:, 1983, 84 с. Привалова Л.И. Гигиенические аспекты неспецифического действия малорастворимых цитотоксических пылевых частиц. Дисс. докт. мед. наук. - Свердловск,– 1990. 389с. Хмельницкий О.К. Цитологическая и гистологическая диагностика заболеваний щитовидной железы (Руководство). –С.-Петербург: СОТИС, 2002. –287с. А. Хэм, Д. Кормак «Гистология» - т. 2 - Москва - 1983 – 254 с. Дурнев А.Д. Модификации мутационного процесса // Вестник РАМН. 2001. №3, 70-76 с. Pastinen, T., A. Kurg, A. Metspalu, L. Peltonen, and A-C. Syvanen.1997. Minisequencing: a specific tool for DNA analysis and diagnostics on oligonucleotide arrays. Genome Res. 7:606-614. Pastinen T, Raitio M, Lindroos K, Tainola P, Peltonen L, Syvanen AC.A system for specific, high-throughput genotyping by allele-specific primer extension on microarrays. Genome Res. 2000 Jul; 10(7):1031-42. Остерман Л.А. Исследование биологических макромолекул электрофокусированием, иммунофорезом и радиоизотопными методами. М.: Наука, 1983. - 304 с. Тациевский В.А. Измерение радиоактивности биологических образцов с помощью жидких сцинтилляторов. Мед. Радиол, 1977. - №7. С. 81-89. Урбах В.Ю. Биометрические методы // М.: Наука, - 1964- С. 115-119 – Кислицина, Н.С. Перекисное окисление липидов как один из механизмов патогенеза силикоза (экспериментальное исследование): Дисс. … канд. биол. наук/ Н.С. Кислицина. Свердловск, 1986. -190с. Б.А. Кацнельсон, О.Г. Алексеева, Л.И. Привалова, Е.В. Ползик. Пневмокониозы: патогенез и биологическая профилактика/ - Екатеринбург: УрО РАН, 1995. 325с.